2020 Fiscal Year Annual Research Report
Oncogenic Kit siganlling on intracellular compartments in leukemia, melanoma, and GIST
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18K07208
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| Research Institution | National Cancer Center Japan |
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Principal Investigator |
小幡 裕希 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, ユニット長 (20609408)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | KITチロシンキナーゼ / 異常局在 / ゴルジ体 / 細胞内輸送 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度までに、血液がん (マスト細胞腫, 急性骨髄性白血病), 消化管間質細胞腫 (gastrointestinal stromal tumour: GIST) 等において、無限細胞増殖のキー分子であるKITチロシンキナーゼの活性化変異体が、ゴルジ体やエンドソームに異常局在し、オルガネラから増殖シグナルを発信することを見出した。本年度は、メラノーマにおけるKIT変異体の局在解析と、各種がんにおけるKITのオルガネラ停留の分子メカニズムの解明を試みた。
メラノーマ細胞株の内在性レベルのKIT変異体は、ゴルジマーカー (golgin97, GM130) が分布する核近傍領域に集積していた。KITの活性化の指標である703番目のチロシン残基のリン酸化もゴルジマーカーと一致する位置で起きていた。このデータは、GISTにおけるものと一致しており、固形がんにおけるKIT変異体がゴルジ体に停留することを強く支持する結果となった。
さらに、共免疫沈降法と質量解析を組み合わせ、複数種類のKIT相互作用蛋白質を見出した。現在、それらが局在異常の原因となるかどうかの検討をおこなっている。別のアプローチとして、数十種類の化合物の中から、GISTのKIT変異体のゴルジ停留を解除するものを探索し、幾つかの有望な化合物を得た。それらのターゲット分子が、GISTのKITのゴルジ停留の原因となると予想し、siRNAによるノックダウンによる機能阻害実験, 共免疫沈降法および近接ライゲーション法による相互作用解析をおこなっている。
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[Journal Article] FLT3-ITD transduces autonomous growth signals during its biosynthetic trafficking in acute myelogenous leukemia cells.2021
Author(s)
Yamawaki K, Shiina I, Murata T, Tateyama S, Maekawa Y, Niwa M, Shimonaka M, Okamoto K, Suzuki T, Nishida T, Abe R, Obata Y.
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Journal Title
BioRxiv
Volume: -
Pages: -
DOI
Open Access
