2018 Fiscal Year Research-status Report
Exploring a molecular mechanism governing the metabolism to repress cancer progression depending on genetic backgrounds
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18K07235
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
山本 一男 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (70255123)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | がん / ミトコンドリア / 翻訳制御 / 癌抑制遺伝子 / 代謝 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
細胞サイズ調節遺伝子として同定したLargenによる白血病抑制効果の生化学的・細胞生物学的評価し病態との関連を調べるために、遺伝的に異なるリンパ腫形成モデルマウスにおける影響の違いから検討することを計画した。この目的のためにPtenfl/fl Lck-CreマウスとPtenfl/fl Lck-Cre Largen-Tgマウス、およびp53fl/fl Lck-Creマウスとp53fl/fl Lck-Cre Largen-Tgマウスの4種類の遺伝的背景を持つマウスを準備した。各遺伝子型のマウス群ごとにいくつか個体を解剖し、胸腺・脾臓・リンパ節などを摘出した。生後60日では特に大きな差異は見られなかったが、生後90日ではPtenfl/fl Lck-Creマウスに比べてPtenfl/fl Lck-Cre Largen-Tgマウスの胸腺のサイズが縮小していた。p53変異を背景に持つマウスではこのような差は見られなかった。この組織からT細胞を回収しSUnSET (Surface sensing of translation)法による解析を行ったところ、Largenの強制発現によるタンパク質合成効率の変化が観察された。これらの差異が、異なる遺伝的背景を持つ白血病の発症と進行におけるLargenの作用の違いを説明することにつながることが期待される。さらにこの現象を細胞レベルで理解することを図るために、単離T細胞を用いた細胞外フラックス測定に関する実験を進め、種々の条件設定（細胞調節法、播種数と方法、試薬の指摘濃度等）をするところまで到達した。また胸腺サイズ縮小の原因を探るために組織切片を作製し、細胞数・細胞サイズ・細胞生死の分析をする準備を進めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究計画の第一段階であるLargenによる白血病抑制効果の生化学的・細胞生物学的評価については、生後60日と90日のマウスを用いてある程度達成できた。生後120日、150日の観察期間を設定しているマウス群については、飼育期間上まだ十分な個体数を確保できていないため解析が遅れている。腫瘍形成前の段階で組織のサイズに差が生じていたことは予想外の結果であった。しかしながら発癌過程におけるLargenの作用を考えるに大変興味深い現象であるので、組織化学的な解析を行う体制を整える必要があある。また、T細胞におけるタンパク質合成効率に変化が見られたことは本研究計画における大きな成果であるので、細胞外フラックス測定のセットアップを急ぎ、代謝との関連に関する知見を深めることが求められる。
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| Strategy for Future Research Activity |
マウスの飼育上の問題や予想外の観察結果による解析方針の検討の余地を生じているが、白血病の発生とその進行における代謝機能の影響をLargenと発癌の遺伝的背景との関連から理解するという本研究の目的には問題なく迫りつつある。従って今後もこれまでと同様な方針で研究を継続し、次の目標である他の発癌モデルにおける検討へと展開していきたい。
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| Causes of Carryover |
当該年度に必要な試薬類の購入を済ませた上で、次年度により多くの支出が生じる可能性を考慮したため、残額を繰り越すこととした。次年度使用額は、新たに必要性が増した組織化学的な実験に充てる予定である。
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Research Products
(1 results)
