Repertoirome analysis of antibody genes of peripheral blood memory B cells for qualitative evaluation of tumor associated immune response

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18K07334
• Research Institution: Hoshi University
• Principal Investigator: 築地 信 星薬科大学, 薬学部, 准教授 (90302611)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: がん免疫 / 免疫状態 / 抗体 / scFv-Fc / レパトア / 免疫記憶 / バイオマーカー / 末梢血

Outline of Annual Research Achievements

近年、個別(プレシジョン)医療の推進と共に、次世代の治療法としてがん免疫療法が注目されている。がん病態は、がん細胞の由来や遺伝的因子による個人差により多様であり、免疫状態も多様である。がん免疫治療の現状は、治療が効果的である場合とそうでない場合があり、治療継続の判断が難しい。そこで、病態に合わせた奏功的な治療のために、免疫状態を正しく評価する指標(バイオマーカー)を同定し、治療効果の評価系を確立することが急務である。
私たちは免疫状態を評価する「抗原受容体可変部の遺伝子レパトローム解析法」を確立した。具体的にはB細胞もしくはT細胞をシングルセルレベルに単離し、RT-PCR法にて、個々の細胞が発現している抗原受容体(BCRもしくはTCR)の可変部領域の遺伝子配列と、二量体のペアリングを決定する方法であり、レパトローム(レパトア＋オミックス)解析法と命名した。
マウスリンパ腫細胞株E.G7-OVA細胞を皮下移植し、腫瘍体積の増加を測定した。経時的に末梢血中のB220陽性細胞とCD4陽性細胞の存在比が変化した。それらのBCRとTCRa/bの可変部配列についてレパトア解析を行ったところ、9日目では特定の可変部V断片の使用頻度が変化していた。
これまでに、可変部遺伝子断片を重鎖はIgG定常部と、軽鎖はIgk 定常部と融合できるようにデザインした発現ベクターと、軽鎖の可変部と重鎖の可変部をリンカーで融合したscFv-Fc発現ベクターに組み込み、培養細胞に遺伝子導入し、人工抗体として培養上清に発現することに成功した。
今年度は、新たにTCRの可変部ドメインとIgG1定常部をリンカーで融合したscTCR-Fc発現ベクターの作製に成功した。

Research Products

• [Journal Article] rs9459874 and rs1012656 in CCR6/FGFR1OP confer susceptibility to primary biliary cholangitis (2022)
  • Author(s): Hitomi Yuki、Aiba Yoshihiro、Ueno Kazuko、Nishida Nao、Kawai Yosuke、Kawashima Minae、Yasunami Michio、Gervais Olivier、Ito Masahiro、Cordell Heather J.、Mells George F.、Nagasaki Masao、Tokunaga Katsushi、Tsuiji Makoto、Nakamura Minoru
  • Journal Title: Journal of Autoimmunity Volume: 126 Pages: 102775～102775
  • DOI: 10.1016/j.jaut.2021.102775
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Coronin-1 is phosphorylated at Thr-412 by protein kinase Cα in human phagocytic cells (2021)
  • Author(s): Oku Teruaki、Kaneko Yutaka、Ishii Rie、Hitomi Yuki、Tsuiji Makoto、Toyoshima Satoshi、Tsuji Tsutomu
  • Journal Title: Biochemistry and Biophysics Reports Volume: 27 Pages: 101041～101041
  • DOI: 10.1016/j.bbrep.2021.101041
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Immunomodulatory Activity of an Aqueous Extract of Mycelium of an Endophytic-Like Fungus, Ustilago esculenta (2021)
  • Author(s): Makoto Tsuiji, Junko Nagasaka, Yoshimasa Yajima, Keita Nishiumi, Yasutaka Kojima, Miho Amemiya, Wakana Ogura, Takaaki Moriyama, Tomoko Sakai, Teruaki Oku, Tsutomu Tsuji
  • Journal Title: BPB Reports Volume: 4 (4) Pages: 98 ~ 102
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 腫瘍関連糖鎖抗原を認識する抗体の可変部遺伝子配列の決定と人工抗体の作製 (2022)
  • Author(s): 吉田 昌宏、稲垣 優希、人見 祐基、奥 輝明、伝田 香里、入村 達郎、築地 信
  • Organizer: 日本薬学会年会 142年会
• [Presentation] 免疫細胞特異的アクチン結合タンパク質Coronin-1の発現制御機構の解析 (2022)
  • Author(s): 安藤 祐介、金子 豊、長谷川 晋也、築地 信、渡辺 知恵、奥 輝明
  • Organizer: 日本薬学会年会 142年会
• [Presentation] MUC1糖ペプチドと抗MUC1抗体MY.1E12の相互作用解析 (2022)
  • Author(s): 國府 涼香、倉谷 太豪、高橋 優花、大野 詩歩、真鍋 法義、清水 弘樹、千葉 靖典、伝田 香里、築地 信、入村 達郎、山口 芳樹
  • Organizer: 日本薬学会年会 142年会
• [Presentation] Lacto-N-fucopentaose Iの立体構造および抗iPS細胞抗体R-17Fとの相互作用の解析 (2022)
  • Author(s): 大野 詩歩、大内 陽翔、齋藤 祐希、真鍋 法義、湯浅 徳行、松崎 祐二、築地 信、川嵜 敏祐、山口 芳樹
  • Organizer: 日本薬学会年会 142年会
• [Presentation] 糖鎖抗原を認識する抗体の可変部遺伝子配列の決定と人工抗体の作製 (2022)
  • Author(s): 築地 信、吉田 昌宏、稲垣 優希、石村 彰識、河村 桂輔、獅子原 弘樹、伝田 香里、入村 達郎、中尾 広美、川嵜 敏祐
  • Organizer: 第6回 糖鎖免疫学研究会
• [Presentation] Variable gene repertoirome analysis of peripheral blood BCRs and CD4+ T cell TCRs(alpha/beta) for monitoring of tumor-associated immune responses (2021)
  • Author(s): Makoto Tsuiji
  • Organizer: 第50回 日本免疫学会
• [Presentation] Proenkephalin+ regulatory T cells expanded by ultraviolet B exposure maintain skin homeostasis with a healing function (2021)
  • Author(s): Hiroaki Shime, Mizuyu Odanaka, Makoto Tsuiji, Masaki Imai, Yoshiaki Yasumizu, Ryuta Uraki, Anthony JB, Hidehiro Fukuyama, Naganari Ohkura, Shimon Sakaguchi, Akimichi Morita, Sayuri Yamazaki
  • Organizer: 第50回 日本免疫学会
• [Presentation] Skin regulatory T cells expanded by ultraviolet B exposure have a unique gene expression profile compared to other tissue Treg cells (2021)
  • Author(s): Mizuyu Odanaka, Hiroaki Shime, Makoto Tsuiji, Masaki Imai, Yoshiaki Yasumizu, Ryuta Uraki, Anthony JB, Hidehiro Fukuyama, Naganari Ohkura, Shimon Sakaguchi, Akimichi Morita, Sayuri Yamazaki
  • Organizer: 第50回 日本免疫学会
• [Presentation] Evaluation of immune responses induced by influenza vaccines using antibody repertoire analysis (2021)
  • Author(s): Kayoko Sato, Hideki Asanuma, Makoto Tsuiji
  • Organizer: 第50回 日本免疫学会
• [Presentation] NKT-mediated vaccine induces affinity maturation of BCR and supply antibody dependent protection against Streptococcus pneumoniae (2021)
  • Author(s): Koji Hayashizaki, Shogo Takatsuka, Yasuhiro Kamii, Makoto Tsuiji, Masato Kubo, Yoshimasa Takahashi, Yuki Kinjo
  • Organizer: 第50回 日本免疫学会
• [Presentation] Identification of the primary functional variants in primary biliary cholangitis susceptibility gene CCR6/FGFR1OP (2021)
  • Author(s): Yuki Hitomi, Yoshihiro Aiba, Makoto Tsuiji, Minoru Nakamura
  • Organizer: 第50回 日本免疫学会
• [Presentation] Variable gene repertoirome analysis of peripheral blood BCRs and CD4+ T cell TCRs(alpha/beta) for monitoring of tumor-associated immune responses (2021)
  • Author(s): Makoto Tsuiji
  • Organizer: 2021 JCA-AACR Precision Cancer Medicine International Conference
• [Presentation] 糖鎖抗原を認識する抗体の可変部遺伝子配列の決定と人工抗体の作製 (2021)
  • Author(s): 築地 信、吉田 昌宏、稲垣 優希、石村 彰識、河村 桂輔、獅子原 弘樹、伝田 香里、入村 達郎、中尾 広美、川嵜 敏祐
  • Organizer: 第40回 日本糖質学会年会
• [Presentation] 潰瘍性大腸炎モデルマウスの大腸粘膜固有層に集積する細胞へのブシラミンの効果 (2021)
  • Author(s): 柳澤 直樹、菊池 隼矢、奥 輝明、築地 信
  • Organizer: 第21回 Pharmaco-Hematology シンポジウム
• [Remarks] Makoto Tsuiji (Researchmap)
  • URL: https://researchmap.jp/tsuijimak
• [Remarks] Makoto Tsuiji (Researchgate)
  • URL: https://www.researchgate.net/profile/Makoto-Tsuiji
• [Remarks] Makoto Tsuiji (Orcid)
  • URL: https://orcid.org/0000-0002-5607-4880
• [Remarks] Makoto Tsuiji (Loop)
  • URL: https://loop.frontiersin.org/people/1498398/overview