2021 Fiscal Year Annual Research Report
Repertoirome analysis of antibody genes of peripheral blood memory B cells for qualitative evaluation of tumor associated immune response
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18K07334
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| Research Institution | Hoshi University |
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Principal Investigator |
築地 信 星薬科大学, 薬学部, 准教授 (90302611)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | がん免疫 / 免疫状態 / 抗体 / scFv-Fc / レパトア / 免疫記憶 / バイオマーカー / 末梢血 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、個別(プレシジョン)医療の推進と共に、次世代の治療法としてがん免疫療法が注目されている。がん病態は、がん細胞の由来や遺伝的因子による個人差により多様であり、免疫状態も多様である。がん免疫治療の現状は、治療が効果的である場合とそうでない場合があり、治療継続の判断が難しい。そこで、病態に合わせた奏功的な治療のために、免疫状態を正しく評価する指標(バイオマーカー)を同定し、治療効果の評価系を確立することが急務である。
私たちは免疫状態を評価する「抗原受容体可変部の遺伝子レパトローム解析法」を確立した。具体的にはB細胞もしくはT細胞をシングルセルレベルに単離し、RT-PCR法にて、個々の細胞が発現している抗原受容体(BCRもしくはTCR)の可変部領域の遺伝子配列と、二量体のペアリングを決定する方法であり、レパトローム(レパトア＋オミックス)解析法と命名した。
マウスリンパ腫細胞株E.G7-OVA細胞を皮下移植し、腫瘍体積の増加を測定した。経時的に末梢血中のB220陽性細胞とCD4陽性細胞の存在比が変化した。それらのBCRとTCRa/bの可変部配列についてレパトア解析を行ったところ、9日目では特定の可変部V断片の使用頻度が変化していた。
これまでに、可変部遺伝子断片を重鎖はIgG定常部と、軽鎖はIgk 定常部と融合できるようにデザインした発現ベクターと、軽鎖の可変部と重鎖の可変部をリンカーで融合したscFv-Fc発現ベクターに組み込み、培養細胞に遺伝子導入し、人工抗体として培養上清に発現することに成功した。
今年度は、新たにTCRの可変部ドメインとIgG1定常部をリンカーで融合したscTCR-Fc発現ベクターの作製に成功した。
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Research Products
(21 results)
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[Journal Article] Immunomodulatory Activity of an Aqueous Extract of Mycelium of an Endophytic-Like Fungus, Ustilago esculenta2021
Author(s)
Makoto Tsuiji, Junko Nagasaka, Yoshimasa Yajima, Keita Nishiumi, Yasutaka Kojima, Miho Amemiya, Wakana Ogura, Takaaki Moriyama, Tomoko Sakai, Teruaki Oku, Tsutomu Tsuji
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Journal Title
BPB Reports
Volume: 4 (4)
Pages: 98 ~ 102
Peer Reviewed
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[Presentation] Proenkephalin+ regulatory T cells expanded by ultraviolet B exposure maintain skin homeostasis with a healing function2021
Author(s)
Hiroaki Shime, Mizuyu Odanaka, Makoto Tsuiji, Masaki Imai, Yoshiaki Yasumizu, Ryuta Uraki, Anthony JB, Hidehiro Fukuyama, Naganari Ohkura, Shimon Sakaguchi, Akimichi Morita, Sayuri Yamazaki
Organizer
第50回 日本免疫学会
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[Presentation] Skin regulatory T cells expanded by ultraviolet B exposure have a unique gene expression profile compared to other tissue Treg cells2021
Author(s)
Mizuyu Odanaka, Hiroaki Shime, Makoto Tsuiji, Masaki Imai, Yoshiaki Yasumizu, Ryuta Uraki, Anthony JB, Hidehiro Fukuyama, Naganari Ohkura, Shimon Sakaguchi, Akimichi Morita, Sayuri Yamazaki
Organizer
第50回 日本免疫学会
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