2018 Fiscal Year Research-status Report
EGFRキナーゼ阻害剤獲得耐性機序を治療前に予測する分子マーカーの探索とその応用
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18K07336
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| Research Institution | Kindai University |
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Principal Investigator |
須田 健一 近畿大学, 医学部, 講師 (30631593)
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2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 分子標的治療 / EGFR遺伝子変異 / 獲得耐性 / 上皮間葉転換 / 肺腺がん / CD44 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、CD44 発現の有無が上皮間葉転換（EMT）および EGFR キナーゼ阻害剤（TKI）感受性に影響するかについて、in vitro の検討を施行した。CD44 を高発現する HCC4006 株（EGFR exon 19 欠失）において、CD44 ノックダウン株を樹立した。CD44 ノックダウン株も親株と同程度の EGFR-TKI 感受性を示したが、CD44 をノックダウンしておくことで、HCC4006 株より樹立した EGFR-TKI 耐性株が EMT をきたさないことを観察した。一方、CD44 低発現の HCC827 株（EGFR exon 19 欠失）について、CD44 を遺伝子導入し、CD44 過剰発現株を作成した。CD44 過剰発現株において E-カドヘリンの発現低下は認めなかったが、vimentin 発現の上昇を認めた。一方、EGFR-TKI 感受性は、CD44 過剰発現株でも変化しなかった。
これらのことより、EGFR 変異陽性肺腺がんにおいて、CD44 発現の有無は、EGFR-TKI 治療前の EMT 状態や、EGFR-TKI の感受性には影響を与えないと考えられた。これらの結果は、Suda K., et al. Molecular Cancer Therapeutics 誌（2018）に発表した論文の一部データとして使用した。
また、実臨床では第3世代 EGFR-TKI であるオシメルチニブが１次治療より用いられるようになり、１次治療でのオシメルチニブ耐性を克服する必要性が急務となった。このため、Ba/F3 細胞株を用いてオシメルチニブ獲得耐性株を樹立し、その耐性克服が可能な EGFR-TKI の探索も並行しておこなった。この研究の成果は、Nishino M. and Suda K., et al. Lung Cancer 誌（2018）に発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
In vitro の実験系で必要な CD44 過剰発現株と CD44 ノックダウン株の作成・解析が終了した。臨床検体の解析については、解析対象とする検体のピックアップが終了し、今後免疫染色による解析・評価をおこなう予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、臨床検体の解析に主眼を移して検討をおこなう。
一方、in vitro の解析では、CD44 ノックダウンをおこなった HCC4006 細胞株では EMT 変化を認めなかったことより、今後はこの獲得耐性株の耐性機序の探索もおこなう必要がある。EGFR 遺伝子の2次的変異を認めなかったことより、バイパスシグナルの活性化などを検討する。
また近年、新規 EGFR-TKI である tarloxotinib が開発され、EGFR-TKI 初期耐性や獲得耐性の克服に有用である可能性がある。このため、EGFR-TKI のひとつとして tarloxotinib を含めた in vitro 解析もおこなう予定である。
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[Journal Article] CD44 Facilitates Epithelial-to-Mesenchymal Transition Phenotypic Change at Acquisition of Resistance to EGFR Kinase Inhibitors in Lung Cancer.2018
Author(s)
Suda K, Murakami I, Yu H, Kim J, Tan AC, Mizuuchi H, Rozeboom L, Ellison K, Rivard CJ, Mitsudomi T, Hirsch FR
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Journal Title
Molecular Cancer Therapeutics
Volume: 10
Pages: 2257-2265.
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Effects of secondary EGFR mutations on resistance against upfront osimertinib in cells with EGFR-activating mutations in vitro.2018
Author(s)
Nishino M, Suda K, Kobayashi Y, Ohara S, Fujino T, Koga T, Chiba M, Shimoji M, Tomizawa K, Takemoto T, Mitsudomi T
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Journal Title
Lung Cancer
Volume: 126
Pages: 149-155.
DOI
Peer Reviewed
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