2020 Fiscal Year Annual Research Report
Comprehensive search of autoantibies in neuroimmunological disorders using a novel hybrid SEREX-FACS method
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18K07387
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
森 雅裕 千葉大学, 大学院医学研究院, 准教授 (70345023)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鵜沢 顕之 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (10533317)
八木 良二 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任准教授 (20392152) [Withdrawn]
日和佐 隆樹 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任准教授 (30260251)
星野 忠次 千葉大学, 大学院薬学研究院, 准教授 (90257220)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 視神経脊髄炎 / 神経免疫疾患 / フローサイトメトリー / SEREX法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
理化学研究所のバイオリソース研究センター遺伝子材料開発室よりbrainのcDNAライブラリー（プラスミド）を入手した。serological identification of antigens by recombinant expression cloning（SEREX）法を行うための患者検体を選ぶために、抗体陰性の視神経脊髄炎の中でも再発頻度が高いなど、自己免疫性の機序・自己抗体の存在が強く疑われる患者を抽出し、自己抗体が多く含まれると予想される再発時の急性期血清・髄液検体をまとめた。その中で、さらに免疫抑制剤による維持療法の無い2名の急性期血清を選択した。上記のcDNAライブラリーをHEK293細胞へエレクトロポレーション法で導入したのちに抗生剤G418を用いて導入細胞を選択し、その後、上記患者血清と蛍光標識抗体で抗原抗体反応のある細胞を標識し、FACS AREAにて細胞を選択した。選択した細胞のプラスミドを抽出し、PCRで導入したcDNAのライブラリー部分を増幅してシークエンサーによりヌクレオチド配列を特定した。その結果、1名からは候補遺伝子が抽出できなかったが、もう1名からは2つの患者血清抗体と反応する可能性があるタンパク質の遺伝子候補と1つの抗原抗体反応を間接的に促進させる可能性があるマイクロRNA候補が抽出された。遺伝子から新規自己抗体・抗原検索を行うSEREX法とFACS法を組み合わせて行う新規の自己抗体検索法により、抗体陰性視神経脊髄炎の病態に影響を与える可能性がある遺伝子が抽出できることを確認できた意義は大きい。
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[Journal Article] Anti-MOG antibody-associated disorders: differences in clinical profiles and prognosis in Japan and Germany.2020
Author(s)
Liu J, Mori M, Zimmermann H, Brandt A, Havla J, Tanaka S, Sugimoto K, Oji S, Uzawa A, Asseyer S, Cooper G, Jarius S, Bellmann-Strobl J, Ruprecht K, Siebert N, Masuda H, Uchida T, Ohtani R, Nomura K, Meinl E, Kuempfel T, Paul F, Kuwabara S.
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Journal Title
J Neurol Neurosurg Psychiatry.
Volume: --
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Serum anti-LRPAP1 is a common biomarker for digestive organ cancers and atherosclerotic diseases.2020
Author(s)
Sumazaki M, Shimada H, Ito M, Shiratori F, Kobayashi E, Yoshida Y, Adachi A, Matsutani T, Iwadate Y, Mine S, Machida T, Kamitsukasa I, Mori M, Sugimoto K, Uzawa A, Kuwabara S, et al.
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Journal Title
Cancer Sci.
Volume: 11
Pages: 4453-4464
Peer Reviewed
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[Journal Article] Safety and efficacy of rituximab in neuromyelitis optica spectrum disorders (RIN-1 study): a multicentre, randomised, double-blind, placebo-controlled trial.2020
Author(s)
Tahara M, Oeda T, Okada K, Kiriyama T, Ochi K, Maruyama H, Fukaura H, Nomura K, Shimizu Y, Mori M, Nakashima I, Misu T, Umemura A, Yamamoto K, Sawada H.
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Journal Title
Lancet Neurol.
Volume: 19
Pages: 298-306
DOI
Peer Reviewed
