2021 Fiscal Year Research-status Report

Electroconvulsive stimulation is associated with the permeability of blood-brain barrier

Research Project

Project/Area Number	18K07571
Research Institution	Juntendo University
Principal Investigator	伊藤賢伸順天堂大学, 医学部, 准教授 (90420851)
Project Period (FY)	2018-04-01 – 2023-03-31
Keywords	ECT / 電気けいれん療法 / 電気けいれん刺激 / うつ病 / BBB / 血液脳関門 / 透過性
Outline of Annual Research Achievements	生後6週の雄ラットを使用した。我々はさらに大きな分子であるIgGの透過性について検証した。Fluorescenceを付加したIgG (IgG-FITC) 1mgを上記と同様に尾静脈から投与した。120分後に還流固定し、脳を摘出した。ECSは1回で行った。IVISにて蛍光強度を測定し、blancとの差分をとると、コントロール群14.7x10^8、ECS群23.5x10^8で有意にECS群の蛍光強度は高かった(p = 0.0271)。脳組織内のIgG濃度を測定するため、脳は凍結保存した。BBB透過性の変化がどのようなたんぱく質の作用によるのか検証するために、ECS刺激後に脳と血液を回収し、mRNAを抽出した。ＢＢＢを超えた薬剤投与の検証のために、AAVを購入した。今後これらの解析のため、RNAシーケンスを行う予定である。また、ECS5日後の脳内の形態学的な変化を確認するために、ECS5日後の脳を回収し、電子顕微鏡試料を作成予定である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 2021年度は引き続きコロナ禍が続き、研究員の出入りの制限、海外からの実験材料や試料の納品の遅れなどが目立っていた。動物実験室の飼育ゲージが制限され、多数のラットを同時に飼育できず、グループに分けて実験を行う必要があり、時間がかかった。
Strategy for Future Research Activity	回収したmRNAからＢＢＢ透過性変化の中心的なたんぱく質を同定していく。さらに長期的な変化を確定するため、ＥＣＳ術後5日後の形態変化を電子顕微鏡で確認する。
Causes of Carryover	2021年度もCOVIT-19の影響により、物品の購入が困難となった。さらに当該施設が東京都内であったため、都からの自粛要請もあり、研究者の出勤も制限されるようになった。そのため、購入すべき薬剤が購入できず、繰越金が生じた。繰越金を含めて次年度は、電顕試料の作成、RNSシーケンスなど行っていく予定である。