2023 Fiscal Year Research-status Report
Electroconvulsive stimulation is associated with the permeability of blood-brain barrier
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18K07571
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
伊藤 賢伸 順天堂大学, 医学部, 先任准教授 (90420851)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | ECT / ECS / BBB |
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| Outline of Annual Research Achievements |
6週齢Wistar rat雄に尾静脈からfluorescein (FITC)-conjugated Affinipure Fab Fragment Goat Anti-mouse IgG (H+L)を1mg投与した。その後潅流を行い、脳を摘出した。IVISイメージングシステムを用いて、灌流後も脳に残存したFITC-IgGを測定した。その結果、電気けいれん刺激群(ECS)では、コントロールと比較して有意に蛍光が強く、FITC-IgGが多く残存することが見込まれた(p = 0.0271)。
次に6週齢のWistar rat 雄に麻酔の上で、ECS（100Hz, pulse width 0.5msec,duration 1sec, current 80mA）を行った。その後脳を摘出し、RNAシーケンスを行った。また、ECS後の長期的な形態学的な変化を確認するために、ECS11分後（直後）、5日後、30日後の脳を回収し、電子顕微鏡試料を作成した。ECS直後から、毛細血管周囲のアストロサイト終末足は腫大していた。ECS5日後には、アストロサイト終末足の腫大は一部改善していたが、一部は残存していた。ECS30日後には、コントロールとECS群で大きな違いを認めなかった。以上から、ECSで起こったアストロサイト終末足の変化は、1か月以内には正常化すると考えらえれた。RNAシーケンスの結果は現在分析中である。
ECSによるBBB透過性一過性亢進が見込めることから、脳内の異常蛋白質除去を末梢から投与することで除去できないかを検証する。投与する抗体製剤は非常に効果であるため、尾静脈投与の修練を繰り返し行った。脳内の異常蛋白質蓄積モデルとして、順天堂大学医学部脳神経内科の奥住先生に脳内へのαシヌクレインシード投与方法についてご助言いただき、実行に向けて計画を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
専門知識と手技を要するスタッフの退職があり、引継ぎに時間を要した。
RNAシーケンスのデータの解析に時間を要した。
円安の影響もあり、薬剤が高騰し入手が困難となった。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はRNAシーケンスの結果の解析を進めていく。それと並行して、尾静脈投与と脳内αシヌクレイン投与を習熟し、尾静脈から抗体を投与することで、脳内の異物除去実験を行っていく予定である。
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| Causes of Carryover |
コロナ感染の拡大で、物品の流通が滞り、必要とする資料や資材を適切な時期に入手することが困難であった。そのため、本年予定されていた実験計画の一部を履行することができなかった。それに合わせて1年延長の申請を行い受理されたため、残額を次年度に持ち越した。次年度は、マウスを用いた尾静脈からの投与実験に切り替え、疾患モデルマウスを使った研究を行う予定である。
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