脳神経病変を標的とした異染性白質ジストロフィーの新規治療法(遺伝子治療)の開発

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K07859
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 三宅 紀子 日本医科大学, 医学部, テクニカルスタッフ (00421206)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 三宅 弘一 日本医科大学, 医学部, 教授 (90267211)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 異染性白質ジストロフィー / リソゾーム病 / 遺伝子治療 / アデノ随伴ウイルス

Outline of Annual Research Achievements

リソゾーム酵素欠損症では、一般的に酵素補充療法の有効性が期待できるが神経変性を伴う疾患に対しては血液脳関門（Blood brain barrier:BBB）の存在が大きな障害となり有効な治療戦略が立てられていない。本研究では脳全体の広範な神経変性を伴う、異染性白質ジストロフィー（Metachromatic leukodystrophy:MLD）の非侵襲的かつ安全で脳神経組織に対する長期の酵素補充療法が出来る革新的な治療法の開発を目的としている。我々は新生仔MLDモデルマウスをASA発現AAVベクターを用いて神経病編の治療に成功しているが、本研究では成体マウスにおいても治療が可能となるように、既存のAAVベクターの改良及び治療タンパクの改変を行い、脳神経組織治療に最良のベクターの選択を行う。
今年度は
(1)投与方法の検討:MLDは中枢神経系のみならず、末梢神経の障害や肝臓、腎臓などの臓器などにもスルファチドの蓄積が認められる。昨年度より髄腔内投与による神経症状の改善効果を検討しており、引き続き解析を行った。
(2)解析方法の検討:導入遺伝子、発現の解析をdegital PCR(ddPCR)にて行い、定量化が可能となった。
(3)治療ウイルスの精製：大型動物（サル）での検討を視野にself-complementary adeno-associated-virus (scAAV) type9 治療ベクターの作成と精製を行った。今後大型動物（サル）への投与を予定している。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

大型動物（サル）での解析を昨年度予定していたが、ウイルスベクター及び動物の調達が間に合わず、当初計画よりやや遅れた形となっている。

Strategy for Future Research Activity

MLDマウスモデルを使用した髄腔内治療実験に関しては今後データーをまとめ発表していく。
大型動物（サル）を用いて治療用AAVベクターの静脈投与、髄腔内投与を行い、脳神経組織における酵素活性、分布等を検討すると共に、マウスにおける実験と同様に安全性の評価も行い臨床応用を目指す。

Causes of Carryover

当該年度は大型動物の研究が塩基となったため大型予算の必要がなく、次年度の繰り越すことになった。