B型肝炎ウイルス増殖におけるユビキチン・プロテアソーム系の役割の解析

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K07961
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 田中 康雄 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (40422290)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 建石 良介 東京大学, 医学部附属病院, 特任講師 (50444089)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: HBV / HBV Xタンパク / ユビキチン・プロテアソーム系 / ユビキチンリガーゼ / CUL4-DDB1

Outline of Annual Research Achievements

B型肝炎ウイルス（HBV）のXタンパク（HBｘ）はユビキチンリガーゼCUL4-DDB1と複合体を形成し、増殖に抑制的に働く宿主因子をユビキチン化・分解することが示されており、新たな薬剤標的として注目されている。本研究では、HBV複製におけるユビキチン・プロテアソーム系の関与を包括的に理解することにより、新規抗ウイルス療法の開発を目標とする。
昨年度は、HBxに特異的に結合する宿主因子の一つとして、DDX1(ATP-dependent RNA helicase DDX1）というDEAD-box型RNAヘリカーゼを同定した。本年度は本分子のHBxによるユビキチン化の有無とHBV増殖への関与を検討した。まず細胞内での検討ではHBxによるDDX1のタンパク発現量の減少やユビキチン化は確認できなかった。
一方でHBxとDDX1との結合は確認され、HBｘのトランス活性化ドメインの一部とDDX1のSPRYドメインが両者の結合に重要であった。さらにHepG2.2.15の内在性のDDX1のノックダウンではDDX1の発現低下とともにpgRNAとHBV-DNAが減少、逆にDDX1を発現させたところ、pgRNAとHBV-DNAが増加した。またDDX1のHBxと結合しない変異体はHBV複製を増強させなかった。以上より、DDX1はHBxと結合しHBVの複製に寄与している可能性が考えられた。来年度はその詳細な機序を検討する。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本年度はHBxに結合する宿主因子であるDDX1がHBV複製を正に制御していることを示した。計画は順調に進んでいると思われる。

Strategy for Future Research Activity

来年度は引き続きDDX1のHBV複製における役割の解析を継続する。

Research Products

• [Journal Article] Mutant IDH1 confers resistance to energy stress in normal biliary cells through PFKP-induced aerobic glycolysis and AMPK activation (2019)
  • Author(s): Fujiwara H、Tateishi K、Misumi K、Hayashi A、Igarashi K、Kato H、Nakatsuka T、Suzuki N、Yamamoto K、Kudo Y、Hayakawa Y、Nakagawa 、Tanaka Y、Ijichi H、Kogure H、Nakai Y、Isayama H、Hasegawa K、Fukayama M、Soga T、Koike K
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 9 Pages: 18859
  • DOI: 10.1038/s41598-019-55211-w
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A Novel Non-invasive Method for Predicting Liver Fibrosis by Quantifying the Hepatic Vein Waveform (2019)
  • Author(s): Soroida Y、Nakatsuka T、Sato M、Nakagawa H、Tanaka M、Yamauchi N、Wake T、Nakagomi R、Kinoshita MN、Minami T、Uchino K、Enooku K、Asaoka Y、Tanaka Y、Endo M、Nakamura A、Kobayashi T、Kurihara M、Hikita H、Sato M、Gotoh H、Iwai T、Fukayama M、Ikeda H、Tateishi R、Yatomi Y、Koike K.
  • Journal Title: Ultrasound in Medicine & Biology Volume: 45 Pages: 2363～2371
  • DOI: 10.1016/j.ultrasmedbio.2019.05.028
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Successful treatment of chronic hepatitis C virus infection with crushed glecaprevir/pibrentasvir administered via a percutaneous endoscopic gastrostomy tube: case report and review of the literature. (2019)
  • Author(s): Tanaka Y、Tateishi R、Koike K
  • Journal Title: Clinical Journal of Gastroenterology Volume: 12 Pages: 588-591
  • DOI: 10.1007/s12328-019-00997-5.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Ischemic complications after percutaneous radiofrequency ablation of liver tumors: Liver volume loss and recovery (2019)
  • Author(s): Wake T、Tateishi R、Nakagomi R、Fujiwara N、Kinoshita MN、Nakatsuka T、Sato M、Minami T、Uchino K、Enooku K、Nakagawa H、Asaoka Y、Tanaka Y、Shiina S、Koike K
  • Journal Title: Hepatology Research Volume: 49 Pages: 453～461
  • DOI: 10.1111/hepr.13302
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Blocking CXCLs-CXCR2 axis in tumor-stromal interactions contributes to survival in a mouse model of pancreatic ductal adenocarcinoma through reduced cell invasion/migration and a shift of immune-inflammatory microenvironment. (2019)
  • Author(s): Sano M, Ijichi H, Takahashi R, Miyabayashi K, Fujiwara H, Yamada T, Kato H, Nakatsuka T, Tanaka Y, Tateishi K, Morishita Y, Moses HL, Isayama H, Koike K.
  • Journal Title: Oncogenesis. Volume: 8 Pages: 8
  • DOI: 10.1038/s41389-018-0117-8.
  • Peer Reviewed / Open Access