2019 Fiscal Year Research-status Report
Tumor specific siRNA delivery for KRAS mutant colorectal cancer
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18K07979
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
志村 貴也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (90405192)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田上 辰秋 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 講師 (10609887)
尾関 哲也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 教授 (60277259)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 大腸癌 / ドラッグデリバリー / KRAS変異 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
KRAS変異型大腸癌に有意に高発現する膜結合性タンパクに対する抗体：抗MBP-X抗体をリポソーム表面に結合させたリポソームを担体とし、内部にsiKRASを内包した新規リポソームである①siKRAS-MBP-X-LPの他、コントロールとして表面にIgGを結合した②siKRAS-IgG-LP、非特異的siRNAのコントロール(siNT)を内包した③siNT-MBP-X-LP、④siNT-IgG-LPの4種類のリポソームを作成した。
作成したリポソームがKRAS変異型大腸癌細胞の表面へ集積・結合することを、蛍光免疫染色やフローサイトメトリーにより確認するとともに、癌細胞中のKRASタンパクの発現が抑制されることを確認した。4種類のKRAS変異型大腸癌細胞株を用いた細胞増殖抑制効果の検討において、①siKRAS-MBP-X-LPが、他のリポソームに比べ、より強い細胞増殖抑制効果を示した。
さらにKRAS変異を高頻度みとめる膵癌細胞に対しても同様の実験を行い、リポソームの膵癌細胞への集積・結合とともに、膵癌細胞のKRAS遺伝子の発現を抑制することに加え、①siKRAS-MBP-X-LPが膵癌細胞増殖を抑制することも確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
作成したリポソームは保存により、リポソーム表面に結合した抗体や内包したsiRNAの親和性が低下するため、頻回にリポソームを作成しないといけないため、その作成に時間を要した。
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| Strategy for Future Research Activity |
リポソームの機能を安定化させるために、頻回のリポソーム作成が必要となってくるため、実験のスピード感が極めて大切である。現在、4種類のKRAS変異型大腸癌細胞株と2種類の膵癌細胞株に対して投与実験を行っているため、短時間かつ効率よく実験を行うことが重要である。今年度は、マウスへの投与実験を行うため、癌細胞のマウスへの移植・生着後、速やかに実験を開始することが重要である。
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| Causes of Carryover |
抗体結合型PEG化siRNA内包リポソームの保存可能期間が限定されるため、リポソームの作成が頻回に必要である。共同研究者が他の研究で時間をとられているため、リポソーム作成の作成・安定供給に時間を要しため、次年度使用額が生じた。
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[Journal Article] A multicenter, single-blind randomized controlled trial of endoscopic clipping closure for preventing coagulation syndrome after colorectal endoscopic submucosal dissection.2020
Author(s)
Nomura S, Shimura T, Katano T, Iwai T, Mizuno Y, Yamada T, Ebi M, Hirata Y, Nishie H, Mizushima T, Nojiri Y, Togawa S, Shibata S, Kataoka H.
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Journal Title
Gastrointestinal Endoscopy
Volume: 91
Pages: 859-867
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Urinary Cysteine-Rich Protein 61 and Trefoil Factor 3 as Diagnostic Biomarkers for Colorectal Cancer.2019
Author(s)
Shimura T, Iwasaki H, Kitagawa M, Ebi M, Yamada T, Yamada T, Katano T, Nisie H, Okamoto Y, Ozeki K, Mizoshita T, Kataoka H.
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Journal Title
Translational Oncology
Volume: 12
Pages: 539-544
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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