2020 Fiscal Year Research-status Report
Tumor specific siRNA delivery for KRAS mutant colorectal cancer
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18K07979
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
志村 貴也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (90405192)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田上 辰秋 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 講師 (10609887)
尾関 哲也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 教授 (60277259)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 大腸癌 / ドラッグデリバリー / KRAS変異 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
KRAS変異型大腸癌に有意に高発現する膜結合性タンパクに対する抗体：抗MBP-X抗体をリポソーム表面に結合させたリポソームを担体とし、内部にsiKRASを内包した新規リポソームである①siKRAS-MBP-X-LPの他、コントロールとして表面にIgGを結合した②siKRAS-IgG-LP、非特異的siRNAのコントロール(siNT)を内包した③siNT-MBP-X-LP、④siNT-IgG-LPの4種類のリポソームを作成した。作成したリポソームがKRAS変異型大腸癌細胞の表面へ集積・結合することを、蛍光免疫染色やフローサイトメトリーにより確認するとともに、癌細胞中のKRASタンパクの発現が抑制されることを確認した。4種類のKRAS変異型大腸癌細胞株を用いた細胞増殖抑制効果の検討において、①siKRAS-MBP-X-LPが、他のリポソームに比べ、より強い細胞増殖抑制効果を示した。
さらにKRAS変異を高頻度みとめる膵癌細胞に対しても同様の実験を行い、リポソームの膵癌細胞への集積・結合とともに、膵癌細胞のKRAS遺伝子の発現を抑制することに加え、①siKRAS-MBP-X-LPが膵癌細胞増殖を抑制することも確認した。
さらに、①siKRAS-MBP-X-LPにより、大腸癌・膵臓癌細胞におけるERKやMEKなどのKRAS下流シグナル伝達が抑制された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
コロナウィルスの影響により、研究分担者によるリポソーム作成が滞り、実験が進捗できなかった。また作成したリポソーム間で、結合した抗体量や内包siRNA量にばらつきがありその調整に時間を要した。
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| Strategy for Future Research Activity |
リポソームの機能を安定化させるために、頻回のリポソーム作成が必要となってくるため、実験のスピード感が極めて大切である。現在、4種類のKRAS変異型大腸癌細胞株と2種類の膵癌細胞株に対して投与実験を行っているため、短時間かつ効率よく実験を行うことが重要である。今年度は、マウス実験においては、癌細胞のマウスへの移植・生着後、速やかに実験を開始することが重要である。
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| Causes of Carryover |
抗体結合型PEG化siRNA内包リポソームの保存可能期間が限定されるため、リポソームの作成が頻回に必要である。コロナウィルス感染症による試薬の不安定供給をはじめとした種々の理由により、共同研究者である研究分担者によるリポソーム作成の作成に時間を要し滞ったため、次年度使用額が生じた。
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[Journal Article] Novel and Simple Criteria for Predicting Mortality of Peptic Ulcer Disease.2021
Author(s)
Iwasaki H, Shimura T, Yamada T, Nishigaki R, Okuda Y, Fukusada S, Ozeki T, Kitagawa M, Katano T, Tanaka M, Nishie H, Ozeki K, Kubota E, Tanida S, Kataoka H.
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Journal Title
Internal Medicine
Volume: Feb 22
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Relationship between Immunophenotype and Clinicopathological Findings for Superficial Nonampullary Duodenal Epithelial Tumor2021
Author(s)
Fukusada S, Shimura T, Iwasaki H, Okuda Y, Katano T, Nishigaki R, Ozeki T, Kitagawa M, Nishie H, Tanaka M, Ozeki K, Kubota E, Tanida S, Kataoka H
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Journal Title
Digestion
Volume: Apr 1
Pages: 1-8
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] A multicenter, single-blind randomized controlled trial of endoscopic clipping closure for preventing coagulation syndrome after colorectal endoscopic submucosal dissection2020
Author(s)
Nomura S, Shimura T, Katano T, Iwai T, Mizuno Y, Yamada T, Ebi M, Hirata Y, Nishie H, Mizushima T, Nojiri Y, Togawa S, Shibata S, Kataoka H
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Journal Title
Gastrointestinal Endoscopy
Volume: 91
Pages: 859-867
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Novel urinary protein biomarker panel for early diagnosis of gastric cancer2020
Author(s)
Shimura T, Dayde D, Wang H, Okuda Y, Iwasaki H, Ebi M, Kitagawa M, Yamada T, Yamada T, Hanash SM, Taguchi A, Kataoka H
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Journal Title
British Journal of Cancer
Volume: 123
Pages: 1656-1664
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] The first management using intubation of a nasogastric tube with Gastrografin enterography or long tube for non-strangulated acute small bowel obstruction: a multicenter, randomized controlled trial2020
Author(s)
Katano T, Shimura T, Nishie H, Iwai T, Itoh K, Ebi M, Mizuno Y, Togawa S, Shibata S, Yamada T, Mizushima T, Inagaki Y, Kitagawa M, Nojiri Y, Tanaka Y, Okamoto Y, Sugiura M, Matoya S, Nagura Y, Inagaki Y, Koguchi H, Ono S, Ozeki K, Hayashi N, Takiguchi S, Kataoka H
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Journal Title
Journal of Gastroenterology
Volume: 55
Pages: 858-867
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Serum Exosomal Dicer Is a Useful Biomarker for Early Detection of Differentiated Gastric Adenocarcinoma2020
Author(s)
Okuda Y, Shimura T, Iwasaki H, Katano T, Kitagawa M, Nishigaki R, Fukusada S, Natsume M, Tanaka M, Nishie H, Ozeki K, Yamada T, Kataoka H
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Journal Title
Digestion
Volume: Oct 13
Pages: 1-10
DOI
Peer Reviewed
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