Tumor specific siRNA delivery for KRAS mutant colorectal cancer

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18K07979
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 志村 貴也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (90405192)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田上 辰秋 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 准教授 (10609887) ; 尾関 哲也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 教授 (60277259)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 大腸癌 / KRAS変異 / DDS

Outline of Annual Research Achievements

KRAS変異型大腸癌に有意に高発現する膜結合性タンパクに対する抗体：抗MBP-X抗体をリポソーム表面に結合させたリポソームを担体とし、内部にsiKRASを内包した新規リポソームである①siKRAS-MBP-X-LPの他、コントロールとして表面にIgGを結合した②siKRAS-IgG-LP、非特異的siRNAのコントロール(siNT)を内包した③siNT-MBP-X-LP、④siNT-IgG-LPの4種類のリポソームを作成した。作成したリポソームがKRAS変異型大腸癌細胞の表面へ集積・結合することを、蛍光免疫染色やフローサイトメトリーにより確認するとともに、癌細胞中のKRASタンパクの発現が抑制されることを確認した。4種類のKRAS変異型大腸癌細胞株を用いた細胞増殖抑制効果の検討において、①siKRAS-MBP-X-LPが、他のリポソームに比べ、より強い細胞増殖抑制効果を示した。
さらにKRAS変異を高頻度みとめる膵癌細胞に対しても同様の実験を行い、リポソームの膵癌細胞への集積・結合とともに、膵癌細胞のKRAS遺伝子の発現を抑制することに加え、siKRAS-MBP-X-LPが膵癌細胞の増殖も抑制した。次のステップとして動物実験にて検証するために、研究分担者によりリポソームの作成過程を種々の条件下で検討していただいたが、リポソームの多量生産および長期の安定性を担保することが困難との結論に至り、動物実験での検証は行うことができなかった。

Research Products

• [Journal Article] A Novel Urinary miRNA Biomarker for Early Detection of Colorectal Cancer. (2022)
  • Author(s): Iwasaki H, Shimura T, Kitagawa M, Yamada T, Nishigaki R, Fukusada S, Okuda Y, Katano T, Horike SI, Kataoka H.
  • Journal Title: Cancers Volume: 14 Pages: 461
  • DOI: 10.3390/cancers14020461.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The Risk Analyses of Lymph Node Metastasis and Recurrence for Submucosal Invasive Colorectal Cancer: Novel Criteria to Skip Completion Surgery (2022)
  • Author(s): Ozeki T, Shimura T, Ozeki T, Ebi M, Iwasaki H, Kato H, Inaguma S, Okuda Y, Katano T, Nishie H, Takahashi S, Kataoka H
  • Journal Title: Cancers Volume: 14 Pages: 822
  • DOI: 10.3390/cancers14030822.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Relationship between gene mutations and clinicopathological features in nonampullary duodenal epithelial tumors. (2021)
  • Author(s): Fukusada S, Shimura T, Iwasaki H, Okuda Y, Katano T, Ozeki T, Kitagawa M, Nishie H, Tanaka M, Ozeki K, Kubota E, Tanida S, Kataoka H.
  • Journal Title: Dig Liver Dis. Volume: Dec 24 Pages: in press
  • DOI: 10.1016/j.dld.2021.12.004.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Urinary microRNA biomarkers for detecting the presence of esophageal cancer. (2021)
  • Author(s): Okuda Y, Shimura T, Iwasaki H, Fukusada S, Nishigaki R, Kitagawa M, Katano T, Okamoto Y, Yamada T, Horike SI, Kataoka H.
  • Journal Title: Sci Rep. Volume: 11 Pages: 8508
  • DOI: 10.1038/s41598-021-87925-1.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] 5-aminolaevulinic acid (5-ALA) accumulates in GIST-T1 cells and photodynamic diagnosis using 5-ALA identifies gastrointestinal stromal tumors (GISTs) in xenograft tumor models. (2021)
  • Author(s): Sasaki M, Tanaka M, Ichikawa H, Suzuki T, Nishie H, Ozeki K, Shimura T, Kubota E, Tanida S, Kataoka H
  • Journal Title: PLoS One Volume: 16 Pages: e0249650
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0249650.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Relationship between Immunophenotype and Clinicopathological Findings for Superficial Nonampullary Duodenal Epithelial Tumor. (2021)
  • Author(s): Fukusada S, Shimura T, Iwasaki H, Okuda Y, Katano T, Nishigaki R, Ozeki T, Kitagawa M, Nishie H, Tanaka M, Ozeki K, Kubota E, Tanida S, Kataoka H.
  • Journal Title: Digestion Volume: 102 Pages: 870
  • DOI: 10.1159/000514812.
  • Peer Reviewed