癌間質相互作用と癌組織の多様性を標的とした進行膵癌に対する分子治療法開発の試み

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K07981
• Research Institution: Tohoku Medical and Pharmaceutical University
• Principal Investigator: 佐藤 賢一 東北医科薬科大学, 医学部, 教授 (10282055)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 膵癌 / 癌幹細胞

Outline of Annual Research Achievements

膵癌の治療の困難さの要因の主なものとして、1)豊富な間質との相互作用による強力な癌進展促進と2)癌組織の多様性が挙げられる。そこで、進行膵癌症例に対する画期的な治療法の確立を最終目標に、①膵癌幹細胞と非癌幹細胞の両者共通となる治療標的分子を同定し、②その分子治療がPeriostinの直接的な膵癌細胞への進展促進的な作用とともに、間接的な Tumor associated macrophage の誘導などを介した癌進展機構を誘導しないか検証することが本研究の目的である。本年度は、膵癌幹細胞と非膵癌幹細胞に対する治療効果のある物質や分子の同定するために、Patient-derived xenograft（PDX）の作製を行った。膵癌手術検体の一部を細切し、免疫不全マウス(NOD/Shi-scid, IL-2γnull,　NOGマウス)の皮下に移植する。PDX腫瘍は継代可能であり、NOGマウスの数だけ、PDX腫瘍を得ることが可能である。5代以上継代を経ても同様の組織系を呈することを確認している。現在継代を続けている段階である。これらのPDX細胞にPKM2のショートヘアピンRN（shRNA）を導入し、PKM2発現抑制細胞を作成し、その抑制細胞をNOGマウス皮下に移植して増殖した細胞を膵癌幹細胞として実験に用いる予定としている。現在膵癌細胞の増殖を最も効率よく抑制するショートヘアピンRNAを作製するための基礎実験を行っており、ショートヘアピンンの配列を検証しているところである。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

現在まで、膵癌細胞を移植したマウス上での腫瘍生育が確認されたマウスが少数であり、解析に必要なPDXの作製に時間を要しているために、やや遅れている。細胞株を用いた実験に関しては予定通りに進んでいる。

Strategy for Future Research Activity

免疫不全マウス皮下での移植癌細胞の生育が予定通りに進まないために、移植する検体の数を増やしたり、移植片を増やすなどの工夫を行いPDX作製をすすめる。同時に細胞株を用いた実験を行っていく。

Causes of Carryover

予定した数のPDXが作製できなかったことから、本年度の支出が少なかった。来年度はスピードアップをして、多くのPDXを作製する。