2019 Fiscal Year Research-status Report
Elucidation of invasive propagation of pancreatic cancer cells via exosomes and discovery of inhibitors of invasive propagation
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18K07983
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| Research Institution | Kanazawa Medical University |
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Principal Investigator |
島崎 猛夫 金沢医科大学, 総合医学研究所, 准教授 (50377420)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 聡子 金沢医科大学, 総合医学研究所, 助手 (00768161)
松尾 洋一 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (40381800)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | エクソソーム / 抗がん剤 / 耐性株 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、エクソソームが癌の転移や化学療法抵抗性に重要な役割を担っており、浸潤性や治療耐性に関与するmicroRNA(miRNA)を含んだexosomeを介して全体の抗がん剤耐性や浸潤性を増加させていることを明らかにする研究であり、二年目は、薬剤によるエクソソームの反応と、それを受けた細胞の変化について解析を行った。
方法：ヒト膵がん細胞PANC-1、AsPC3、MIAPaca、膵癌に対する抗がん剤Gemcitabine（GEM)耐性細胞としてAsPC3-GR、MIAPaca-GR、正常膵管上皮細胞PEを用いて、GEMと5-FUによるエクソソーム分泌数や細胞内局在の変化、エクソソーム表面マーカーCD9/63/81発現の変化を、粒度分布測定装置、ウエスタンブロット法、ELISA法を用いて検討した。エクソソームの局在を可視化するために、脂質膜染色剤及びCD63-GFP融合遺伝子発現細胞を用いた。抗がん剤の影響を分析するために、濃度IC80のGEMと5-FUを使用した。結果：GEM感受性株、耐性株では、必ず耐性株がエクソソームの分泌数が多いといったことは認めず、耐性株との関連は認めなかった。また、これら細胞の種類や抗がん剤耐性との関連、薬剤の違いでのエクソソームのサイズ構成について検討を行ったが、有意な変化は認めなかった。しかし、がん細胞株において、抗がん剤により１細胞あたりのエクソソームの分泌量が増加した。しかし、エクソソーム1個換算のCD63等の表面マーカー発現量は減少しており、エクソソームの産生量及び表面マーカーの数といったエクソソームの性状は、抗がん剤により影響を受けることが明らかとなった。結語：エクソソームの分布および量は抗がん剤により影響を受けるが、耐性株との関連は見いだせなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究分担者である助手の産休のために、研究の進展が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究を強力に進めるために、スクリーニング用の機器の確保に努力している。機器の確保ができれば、研究を劇的に進めることが可能になる予定である。
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| Causes of Carryover |
研究分担者である研究助手の産休に伴い、研究の進行が遅れた。そのため、使用する研究費が少なくなり、産休明けの翌年度に研究内容を持ち越すこととなった。
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