2018 Fiscal Year Research-status Report
劇症型アニサキス症における発症要因・メカニズムの解明とリスク管理の構築
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18K08009
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| Research Institution | Oita University |
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Principal Investigator |
水上 一弘 大分大学, 医学部, 准教授 (60548139)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉山 広 国立感染症研究所, 寄生動物部, 主任研究官 (00145822)
村上 和成 大分大学, 医学部, 教授 (00239485)
飛彈野 真也 大分大学, 医学部, 助教 (80516386)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | アニサキス症 / アレルギー / 感作経路 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
アニサキス症は、推計では年間約7000例も発症するとされる重要な寄生虫性疾患である。通常アニサキス症とは、幼線虫が胃や腸に穿入し激しい腹痛を引き起こす劇症型アニサキス症を指すが、近年検診目的で上部消化管内視鏡検査を受ける国民が増加し、それに伴って無症状で偶発的に発見される無症候型アニサキス感染者の発見が増加している。我々は、太平洋側に位置する大分県のサバにはA. simplex ssが優先的に寄生し、日本海側の長崎県のサバにはA.pegreffiiが優位であるにも関わらず、両県のアニサキス症患者からもA.simplex ssが多く感染していることを見出した。さらに、劇症型アニサキス症患者の26.6％に罹患歴があるものの無症候型感染者には罹患歴がないことから、複数回感作されることで劇症化する可能性が示唆された。加えて、生きたアニサキスを単回あるいは複数回マウスに経口感染したところ、繰り返し感染させることがアニサキス特異的IgE抗体価の上昇に不可欠であることを見出している。以上のことから、劇症型と無症候型を規定する因子は、アレルギー反応によるものである可能性を示してきた。
今回我々は、アニサキス特異的IgE抗体の誘導の経緯について検討を行った。BALB/cマウスに、生きたアニサキスの経口感染する群とアニサキスホモジネートの経口投与する群で、産生されるIgE抗体価を比較したところ、アニサキス特異的IgE抗体価は、ホモジネートの経口投与では上昇せず、生きたアニサキス幼虫の反復経口感染で上昇した。以上より、アニサキス幼虫が繰り返し胃壁に穿入することでIgEが上昇しアレルギーが惹起され劇症化する可能性が示唆された。
さらに、生きたアニサキスの経口感染をA. simplex ssあるいはA.pegreffiiに分けて行ったが、どちらのアニサキス種の経口感染でもアニサキス特異的IgE抗体価の上昇が認められ、その産生量に顕著な差は認められなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は、アニサキス特異的IgE抗体の誘導にはアニサキスの胃への穿入が不可欠なのか、それともアニサキス抗原が消化管を通過するだけで十分なのか明らかにすることとした。
BALB/cマウスに、生きたアニサキスの経口感染とアニサキスホモジネートの経口投与とで、産生されるIgE抗体価を比較した。その結果、アニサキス特異的IgE抗体価は、ホモジネートの経口投与では上昇せず、生きたアニサキス幼虫の反復経口感染で上昇した。以上より、アニサキス幼虫が繰り返し胃壁に穿入することでIgEが上昇しアレルギーが惹起され劇症化する可能性が示唆された。
さらに、生きたアニサキスの経口感染をA. simplex ssあるいはA.pegreffiiに分けて行い、アニサキス種の違いによってアニサキス特異的IgE抗体価に違いが出るのかどうか解析したところ、どちらのアニサキス種の経口感染でもアニサキス特異的IgE抗体価の上昇が認められ、その産生量に顕著な差は認められなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
（１）アニサキス穿孔部位における劇症化因子は何か？
劇症型アニサキス症は虫体が胃壁に穿入して激しい腹痛を引き起こす。そこで、単回あるいは複数回生きたアニサキスを経口感染させたマウスから虫体が穿入した胃の組織を摘出し、好酸球の浸潤に着目して病理解析を行う。同様にアニサキスホモジネートを経口投与したマウスの胃も病理解析を行う。さらに、虫体が穿入した胃の組織からRNAを抽出し、次世代シーケンサを用いた遺伝子発現量解析 (RNA-Seq)を行い、痛覚刺激やアレルギーを惹起させる劇症化因子を探索する。
（２）近年、腸管寄生性線虫の感染によるTh2型免疫応答の誘導に、Neuromedin U (NMU)とその受容体が重要であることが報告されている(Klose CSN. Nature 2017.)。Th2応答は、寄生虫感染だけでなくアレルギーにも関係する免疫応答である。興味深いことに、NMUは胃で恒常的に発現していることから、生きたアニサキスが複数回胃に穿入すると、NMUとその受容体下流シグナルが活性化しTh2型免疫応答を強く誘導しアニサキスアレルギーが発症するのではないかという発想に至った。申請者は、NMU欠損マウスを繁殖維持しているので、このマウスにアニサキスを感染させて、アニサキスアレルギーが発症する原因にNMUが関与するか明らかにする。
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| Causes of Carryover |
予想より実験が進み、費用を節減することができた。今後次のステップで使用していく予定。
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