肝細胞癌に対するGAS5遺伝子を用いたマクロファージ療法

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K08018
• Research Institution: Osaka Medical College
• Principal Investigator: 大濱 日出子 大阪医科大学, 医学部, 助教 (60794782)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 朝井 章 大阪医科大学, 医学部, 准教授 (30622146) ; 小谷 卓矢 大阪医科大学, 医学部, 講師 (80411362)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: GAS遺伝子 / マクロファージ

Outline of Annual Research Achievements

肝細胞癌患者は、抗腫瘍免疫を持たないM2b単球/マクロファージを優位に認めるため、癌の進展を食い止めることができない。そのM2b単球/マクロファージはautocrine factorであるCCL1により長期にわたり維持される。長鎖型non coding RNAの一つであるGrowth Arrest Specific 5 (GAS5) RNAはCCL1遺伝子発現を抑制することからこのGAS5　RNAをM2b単球/マクロファージに導入し、抗腫瘍免疫を回復しうるかについて研究を行なっている。前年度はGAS5遺伝子発現が不安定であったため、当該年度は安定したGAS5遺伝子発現できる条件を検討しGAS5 RNAをエンコードしたlentivirusを作成し、マウスのマクロファージにGAS5 RNAを導入する実験を行なった。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

GAS5をエンコードしたlentivirusを作成し、マウスのマクロファージに感染させることを試みているが、GAS5遺伝子の発現が不安定であったため、GAS5遺伝子の安定を図るためPrimerや試薬の調整を繰り返していること、注入後マクロファージ/単球の単離に至る日数調整などを繰り返していたことが遅延の原因と考える。

Strategy for Future Research Activity

今後、GAS5 RNA導入効果を安定させる条件を見つける。次にマウスに対してこのGAS5　lentivirusを感染させ、このGAS5 RNAが効果的に導入されるかどうか検討する。

Causes of Carryover

本年度はGAS5遺伝子の安定した導入方法が見いだせず実験に遅延が生じたため、GAS5 RNAのマクロファージ/単球内での安定性を見るために必要と考えていたSTAMマウスを購入していない。次年度ではこれらマウスの購入、また当初予定していたGAS5遺伝子導入療法による発癌抑制効果を見るための12週齢STAMマウスも購入する予定である。