2022 Fiscal Year Annual Research Report
GAS5 gene therapy on macrophage for hapatocellular carcinoma
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18K08018
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| Research Institution | Osaka Medical and Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
大濱 日出子 大阪医科薬科大学, 医学部, 非常勤医師 (60794782)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
朝井 章 大阪医科薬科大学, 医学部, 准教授 (30622146)
小谷 卓矢 大阪医科薬科大学, 医学部, 特別職務担当教員(講師) (80411362)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | M２b単球 / GAS5遺伝子 / CCL1 / 肝細胞癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
肝細胞癌患者は、抗腫瘍免疫を持たないM2b単球/マクロファージを優位に認めるため、癌の進展を食い止めることができない。そのM2b単球/マクロファージはautocrine factorであるCCL1により長期にわたり維持される。長鎖型non coding RNAの一つであるGrowth Arrest Specific 5 (GAS5) RNAはCCL1遺伝子発現を抑制することからこのGAS5 RNAをM2b単球/マクロファージに導入し、抗腫瘍免疫を回復しうるかについて研究を行なっている。GAS5をエンコードしたlentivirusをマクロファージに安定して導入する実験を行っていたが安定条件が確定せず、当該年度はTHP-1を用いてGAS5-lentivirusの発現安定条件を検討した。具体的には、THP-1に対し、GAS5 RNAをエンコードしたlentiivirusをlentivirus濃度を各段階に割り振りし、蛍光顕微鏡での細胞へのlentivirusの感染程度の観察、およびflowcytometryでの感染程度の評価を行い、再現性のある遺伝子導入を行うための最適な多重感染度を求めた。Lentivirusは完成したものの、対象細胞への効果的な感染が認められず、当初の目的であるM2b単球/マクロファージの性質を変化させるには至らなかった。そのため、この細胞の抗腫瘍免疫を回復させることができなかった。他の遺伝子治療法でM2b単球/マクロファージの性質を変え、抗腫瘍免疫を回復させる事を今後検討していく方針である。
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