2018 Fiscal Year Research-status Report
Coiled-coil領域の重合阻害を誘導する薬剤による融合遺伝子肺癌の治療開発
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18K08132
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| Research Institution | Asahikawa Medical College |
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Principal Investigator |
佐々木 高明 旭川医科大学, 医学部, 助教 (70516997)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大崎 能伸 旭川医科大学, 大学病院, 教授 (30191935)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | ペプチド創薬 / EML4-ALK |
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| Outline of Annual Research Achievements |
EML4-ALK融合遺伝子を有する非小細胞肺癌に対して、EML4の重合阻害を引き起こすペプチドを創薬した。EML4のcoiled-coil(CC)領域に一致したペプチドを作成し、また、CC領域の三量体結合部位を変異させた変異CC領域、さらにCC領域のペプチドを安定化させるためにペプチド間をstaple構造架橋を加えて固定し、細胞内透過性やペプチド安定性を増した試薬を作成した。
EML4-ALK融合遺伝子を有する、非小細胞肺癌細胞株であるH3122細胞株に対してこれらのペプチドを添加して細胞増殖抑制効果を各種濃度で検討したが、30 ng/mlの濃度で添加した場合、細胞増殖アッセイで-20%の増殖抑制を認めた。市販のiDimerizer kitを用いALKの細胞内ドメインを人工的に２量体化/単量体化する実験系を作成し、マウス由来のIL6依存性B細胞株であるBaF3細胞に遺伝子導入した。単量体ではALKリン酸化活性を失い、細胞増殖は止まり、免疫不全マウスの皮下腫瘍移植モデルでは、単量体化することで腫瘍は縮小することが明らかになった。ALKが単量体で活性を有するF1174L変異体に関する検討も行っている。野生型より細胞増殖抑制効果が低いことを確認している。
現在、このペプチドの細胞内移行性を調整し、安定化させるためにCC領域ペプチド各種修飾を行っている。今後より有効な細胞内デリバリーを検討しペプチド創薬とつなげていく予定。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ペプチドの解析や細胞内移行の検討に時間を要したが、おおむね順調に進展している
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| Strategy for Future Research Activity |
マウスなどの皮下腫瘍移植モデルにおいても本ペプチド治療が有効であるか検討する。
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| Causes of Carryover |
使用予定のペプチドを再考して次年度に作成することにしたため
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