2018 Fiscal Year Research-status Report
Investigation of the role of NFAT5 in chronic kidney injury.
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18K08247
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
泉 裕一郎 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 助教 (20736243)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
向山 政志 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (40270558)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 腎尿細管 / NFAT5 / 尿濃縮 / 慢性腎障害 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の初年度の目的として、尿細管細胞の浸透圧応答転写因子NFAT5の生理的役割を明らかにするために、実験を進めた。
NFAT5ドキシサイクリンの飲水投与により、尿細管特異的にNFAT5をノックアウトした。その後、自由飲水、食餌摂取下に飼育した。定期的に代謝ケージ内で蓄尿し、尿量、尿浸透圧、尿中電解質排泄量などを測定した。またtail cuff法にて血圧を測定した。約3か月の観察後サクリファイスし、下大静脈または大動脈より血液を採取し、血中電解質濃度、尿素窒素値、クレアチニン値、浸透圧、各種ホルモン値などを測定した。また腎組織を採取し、リアルタイムPCR法とウェスタンブロッティングによって、尿濃縮関連遺伝子群と尿中ナトリウム再吸収関連遺伝子群のmRNAと蛋白の発現量を評価した。
その結果、野生型マウスに比べて、NFAT5ノックアウトマウスでは多尿と尿浸透圧の低下を生じ、一方ナトリウム排泄量の減少を生じることを確認した。血圧はノックアウト群でやや高値を示した。血液検体においては、血清ナトリウム濃度の高値を認めた。腎組織の遺伝子発現については、尿濃縮関連遺伝子である、水チャネルAQP2や尿素トランスポーターUTA-1のｍRNAの発現が減少していた。AQP2については蛋白発現も同様に減少していることを確認した。現在、その他の尿、血液検査結果や、腎組織内の遺伝子発現量について検討し、解析を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
結果の解析中であるが、次年度の実験モデルの作製を開始しており、おおむね当初の計画通りに実験を遂行している。
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| Strategy for Future Research Activity |
当初の計画通り、NFAT5ノックアウトマウスを用いて、片側尿管結紮腎線維化モデルを作製し、野生型マウスと線維化の程度について、組織染色法にて検討する。各種線維化、腎障害マーカー遺伝子群の発現をリアルタイムPCR法やウェスタンブロッティングによって評価する。
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[Presentation] Intraglomerular cross-talk between mesangial cells and podocytes inhibits normal ER-associated degradation processes and induces podocyte injury in diabetic nephropathy.2018
Author(s)
Fujimoto D, Kuwabara T, HataY, Umemoto S, Kanki T, Nishiguchi Y, Mizumoto T, Hayata M, Izumi Y, Kakizoe Y, Mukoyama M
Organizer
米国腎臓学会 Kidney Week 2018
Int'l Joint Research
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[Presentation] Osteocrin, a bone-derived humoral factor, exerts a renoprotective role in ischemia-reperfusion injury in mice.2018
Author(s)
Nishiguchi Y, Kuwabara T, Umemoto S, Fujimoto D, Kanki T, Hata Y, Yokoi H, Izumi Y, Kakizoe Y, Mukoyama M
Organizer
米国腎臓学会 Kidney Week 2018
Int'l Joint Research
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