2020 Fiscal Year Annual Research Report
Validation of the PIP3 Threshold Model in Melanoma Progression and Resistance to Treatment
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18K08288
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| Research Institution | Nippon Medical School |
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Principal Investigator |
長田 真一 日本医科大学, 医学部, 准教授 (00244484)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | メラノーマ / PTEN / INPP4B / イノシトールリン脂質 / シグナル伝達 / ノックアウトマウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究期間最終年度となる令和２年度は、昨年度に樹立したPIP3レベルの異なるメラノーマから樹立した細胞株を用いて、増殖能、およびBRAF阻害薬、MEK阻害薬に対する感受性を調べた。再現性、定量性を高めるために、解析は全自動生細胞解析システムIncuCyteを用いて行った。用いた細胞株は全てPten遺伝子がホモ欠損なのでP0と表示し、Inpp4b遺伝子については野生型をI2, ヘテロ欠損をI1、ホモ欠損をI0であらわした。すなわち、用いた細胞はP0I2, P0I1, P0I0であり、それぞれ2系統ずつ解析した。本計画では、Pten変異にInpp4B変異が加わると、より悪性度の高いメラノーマになること、すなわち増殖能、薬剤抵抗性が高まることを予想した。
（増殖能について）予想通り、P0I1株は2系統ともP0I2株より増殖能が高まっていた。しかし、P0I0株については、1系統はP0I1株と同程度増殖能が高まっていたが、もう１系統はP0I2とほぼ変わらなかった。
（BRAF阻害薬、MEK阻害薬感受性について）予想通り、P0I1株は2系統ともP0I2株よりBRAF阻害薬であるデブラフェニブ、および、MEK阻害薬であるPD0325901に対する抵抗性が高まっていた。しかし、P0I0株については、1系統はデブラフェニブ、およびPD0325901に対する抵抗性がP0I2株より高まっていたのの、P0I1株ほど高まっていなかった。
以上を総合すると、Pten欠損下でInpp4ｂがヘテロで欠損した時は、増殖能、薬剤抵抗性が上昇し、メラノーマの悪性度が高まることがわかった。一方で、Inpp4ｂがホモで欠損すると、さらに増殖能や抵抗性が高まるという結果は得られなかった。このことは、Inpp4ｂがホモで欠損すると、何らかの代償機構が働くことを意味している。
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