2018 Fiscal Year Research-status Report
多発性骨髄腫進展のドライバー因子の同定と早期治療介入への応用
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18K08336
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Research Institution | Jichi Medical University |
Principal Investigator |
黒田 芳明 自治医科大学, 医学部, 非常勤講師 (00625840)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古川 雄祐 自治医科大学, 医学部, 教授 (00199431)
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Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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Keywords | 多発性骨髄腫 / APOBEC3B / MGUS / 点突然変異 |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、APOBEC3遺伝子の異常ががん関連遺伝子の点突然変異やゲノムの不安定性を惹起しMGUSから多発性骨髄腫の進展および多発性骨髄腫の悪化を促進するという仮説の検証、ならびにAPOBEC3遺伝子の骨髄腫の進展予測と治療介入のマーカーとしての応用・これを標的とする新規抗骨髄腫薬の開発である。以下に結果を要約する。 骨髄腫細胞においてはAPOBECファミリーのうちAPOBEC3B(A3B)が特異的に強発現していたが、骨髄腫細胞株ではその中でもintron7が含まれた異常なmRNA(A3Bi7)が発現していることを見出した。上記結果を踏まえ、A3BおよびA3Bi7を強発現するトランスジェニックマウスを作成した。多発性骨髄腫が発症するかどうかを確認するため、トランスジェニックマウスのライン化を現在準備している。また、A3Bi7と正常A3Bの機能の違いを明らかにするため、A3Bi7と野生型A3B cDNAを293細胞に導入し、C>T変異が入ると発光するプローブを用いてcytidine deaminase活性を測定する実験系を確立し、C>T変異をDNAシークエンシングにて確認している。正常A3BとA3Bi7をそれぞれ特異的に増幅するPCR primerを設計し、real-time RT-PCRによって発現を定量化する実験系を確立し、健常人末梢リンパ球などを対照に用いて、共同研究施設におけるMGUS/骨髄腫患者におけるA3B強発現とA3Bi7の特異的発現を確認している。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
実験系の確立と、トランスジェニックマウスの作成は成功したが、継代化に時間を要している。また、臨床検体の集積も予定より遅れがみられている。
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Strategy for Future Research Activity |
予定通り、骨髄腫細胞に発現しているA3Bi7と正常A3Bの機能の違いを明らかにしていく。引き続きトランスジェニックマウスのライン化・観察を行い、骨髄腫発症を確認する。患者検体のA3Bi7の発現解析を継続し、進展予後との関連を評価する。患者検体集積を増やすため、共同研究施設の追加を検討する。
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Causes of Carryover |
A3B/A3Bi7 transgenic mouseのライン化が遅れているため、維持継代・繁殖の費用として計上していた予算が余った。次年度早々にはライン化が可能となるため、繰り越した予算で繁殖を行い、研究を進める。
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