2020 Fiscal Year Annual Research Report

Exploration of pathogenetic role of citrullinated ITIH4 in rheumatoid arthritis

Research Project

Project/Area Number	18K08403
Research Institution	University of Tsukuba
Principal Investigator	松本功筑波大学, 医学医療系, 准教授 (30343081)
Project Period (FY)	2018-04-01 – 2021-03-31
Keywords	関節リウマチ / シトルリン化蛋白 / 好中球
Outline of Annual Research Achievements	ITIH4(inter-alpha trypsine inhibitor heavy chain 4)とシトルリン化（cit）-ITIH4の炎症関節での発現、peptidylarginine deiminase（PAD）酵素との関連、および好中球の遊走への関与を検討した。 1)ペプチドGPI誘導関節炎（pGIA）マウスにおいて、検討した組織および血漿において、cit-ITIH4の発現量は関節炎極期(day14)の関節において最多であった（p<0.01）。pGIAマウスのPAD４発現に関して、day14の関節においてPAD4ｍRNAの有意な増加を認めた（p<0.05)。また、その発現細胞の90.4%が好中球であった。 2)pGIAに対するin vivoの好中球除去により関節炎が減弱し、血中および関節内のcit-ITIH4の有意な発現低下を認めた(p<0.05)。 3)リコンビナントITIH4蛋白をコントロール蛋白（フィブリノーゲン）とともに作成し、PAD4でシトルリン化した。Cit-ITIH4の添加で、C5a濃度が有意に増加し、好中球の遊走が有意に増強した（p<0.05)。これらより、関節の好中球PAD4を介したITIH4のシトルリン化が推測された。またcit-ITIH4が補体活性化を介し、好中球を遊走させる新たな可能性が示唆された（Osada et al. Clin Exp Immunol 2021)。今後、ノックアウトマウスを用いたITIH4の機能解析を進める予定である。