2019 Fiscal Year Research-status Report
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18K08537
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
坂井 幸子 滋賀医科大学, 医学部, 助教 (10710478)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
久保田 良浩 滋賀医科大学, 医学部, 非常勤講師 (30305601)
加藤 久尚 滋賀医科大学, 医学部, 医員 (40756756) [Withdrawn]
谷 眞至 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (60236677)
清水 智治 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (70402708)
田尻 達郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80304806)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | Hirschsprung病診断 / Calretinin免疫染色 / Cholintransporter免疫染色 / Cholin Acetyltransferase |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の第一の目的は、新生児期の腸管ホルマリン固定標本を用いてCalretinin免疫染色（CR染色）とCholine transporter免疫染色（ChT染色）を行い、これら を併用することで、従来のAcetylcholinesterase染色（AChE染色）のみでは困難であった、新生児早期や早産児におけるHirschsprung病（H病）の確定診断を行えることを証明することである。本年度の研究成果は以下の通りである。
①前年度につづきChT染色を対象患者の検体で行った。ChT抗体をメーカーを変えて複数用意し、染色条件も複数回変えて行った。【結果】ChT染色陽性線維はあるものの、正常腸管かH病腸管かの評価が困難であり、H病診断におけるChT染色の有用性は証明できなかった。
②ChT以外のコリン作動性神経を確認する抗体として、コリンアセチル基転移酵素（ChAT）抗体を用い、対象症例の腸管検体に対し免疫染色を施行した。【結果】 正常部では粘膜下、筋層間の神経節細胞と神経線維の陽性が確認できた。病変部では粘膜下層の陽性繊維束を一部で確認できたが、粘膜内の神経線維の増生は評価困難であった。
これらの結果から、ChT染色と比較すると、ChAT染色の方が神経線維の増生の評価に適しているものの、確定診断における有用性の証明までには至らなかった。
今後はChAT染色の染色条件を変えての再試行に加え、他の有用な神経線維マーカーとの併用による評価を検討している。H病疑いの患者を対象とする実臨床への応用へは至っていない。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
ChT免疫染色の結果が当初の予定と異なったため、他の免疫染色を加えて再検討をする必要があるため。
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| Strategy for Future Research Activity |
ChT染色に変わって、ChAT染色を用い、CR染色とともに新しいHirschsprung病の診断法としての有用であるか検討する。
また、将来的なHirschsprung病の病態解明のための研究に向けて、他の神経系一次抗体による免疫染色とChAT染色を併用し、H病腸管の神経分布について研究を進める予定である。
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| Causes of Carryover |
研究が当初の予定よりも遅延しており、実験補助者を必要とすることが少なかった。また、研究成果を発表することが現時点でできないため、発表のための学会参加や論文作成に使用する研究費が少額となった。これらのため残額が高額となった。
次年度は今年度よりも実験のための物品費（試薬など）が増え、実験補助者への謝金が発生する。また研究で得られたデータの収集、検討のために必要な物品費、研究成果を発表するための学会参加や論文作成にも研究費が必要であるため、これまで以上に研究費が必要と考える。
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