2019 Fiscal Year Research-status Report
１細胞解析法による乳癌内分泌療法抵抗性の解明-血中循環腫瘍細胞からのアプローチ
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18K08572
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
山本 滋 山口大学, 医学部, 特別医学研究員 (30289178)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前田 訓子 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (10738876)
水上 洋一 山口大学, 大学研究推進機構, 教授 (80274158)
佐藤 陽子 山口大学, 医学部附属病院, 診療助教(4日/週) (70794676)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 転移・再発乳癌 / 血中循環腫瘍細胞(CTC) / RNA-sec / シングルセル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
(概要)エストロゲンレセプター(ERα)陽性/HER-2陰性の転移・再発乳癌は、内分泌療法に対しほとんどの症例で治療抵抗性を獲得しており、新たな治療法の開 発は喫緊の課題である。原発巣から血流に流入した乳癌細胞は、転移再発までの抵抗性獲得時点でのリアルタイムスナップショットとみなすことができる。この ため再発患者の血中循環腫瘍細胞(CTC)の全遺伝子を網羅的に解析し、初回手術時の原発巣の変異と比較検討し遺伝子変動を正確に把握することが最も重要で ある。私たちは、これまで40症例以上の原発乳癌の全エクソン領域の次世代シーケンス解析を実施してきた。本研究では、独自に開発した1細胞全ゲノム増幅法を用いて、次世代シークエンサーによるCTCのゲノムエクソーム解析を行い、体細胞変異を同定し変異遺伝子発現細胞を用いて転移・再発乳癌を再現し分子標的 治療の候補分子を解明する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
シングルセル次世代シーケンス技術を検討しQuartz-seq法を用いることでシングルセルから8000遺伝子の発現解析が可能になった。しかし半数以上の細胞でRNAの分解が確認されたことから、分解の原因を検討した。その結果、チューブへの吸着を抑制する成分がRNAの分解を引き起こしていることが明らかになった。そこで、吸着抑制剤を再度、検討し解析を続けた結果、化粧品に使われる成分の1種が細胞の吸着を抑制すると共にRNAの分解も抑制することが明らかになった。
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| Strategy for Future Research Activity |
新たに開発した技術でほぼ100％の細胞できれいなデータが検出された。今後のこの技術を用いて乳癌のシングルセル解析を行い、病態の解明を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
学会旅費として計上していたが、参加回数が減り使用しなかった。
学会および研究試薬などの消耗品に使用予定である。
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Research Products
(8 results)
