静脈内皮細胞からリンパ管内皮細胞へのダイレクト・リプログラミング方法の開発

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K08586
• Research Institution: Asahikawa Medical College
• Principal Investigator: 平田 哲 旭川医科大学, 大学病院, 教授 (80199067)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 齊藤 幸裕 旭川医科大学, 医学部, 准教授 (80540583)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: リンパ管内皮細胞 / ダイレクト・リプログラミング

Outline of Annual Research Achievements

【細胞培養系の確立】HUVECの培養系2系統についてLYVE-1で免疫染色したところ、わずかではあるが（＜５％）陽性細胞が存在することを確認した。同細胞に対してLYVE-1で標識しMACSにて分離を試みている。当初僅かな数の細胞の分離に成功しているが培養系として継代するには至っていない。【誘導因子の準備】ヒトリンパ管内皮細胞からｍRNAを抽出し、Prox1およびVEGFR-3をPCRでクローニングし過剰発現ベクターに搭載したコンストラクトを作成した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

本学の動物実験施設の増改築工事によりマウスを使用した実験に制限がかかっているため。

Strategy for Future Research Activity

培養細胞系については、培養のスケールアップによってリンパ管内皮細胞分画の抽出を実施する。また作成したProx1、VEGFR-3のコンストラクトを静脈内皮細胞に遺伝子導入することにより、LYVE-1をマーカーとしリンパ管内皮細胞の特性を誘導できるのか確認していく。動物実験については今年度中に改修工事が終了するため可及的早期に開始する。

Causes of Carryover

本学の動物実験施設増改築工事によって当初予定していた遺伝子改変マウスの導入ならびに実験が実施できなかったため。ただし2019年度中に開始できる見込みであるため繰り越すこととした。