2019 Fiscal Year Research-status Report
低酸素誘導性ミトコンドリア休眠(HiMS)障害による胃癌悪性度増強機序の解明
| Project/Area Number |
18K08650
|
|---|
| Research Institution | Saga University |
|---|
Principal Investigator |
北島 吉彦 佐賀大学, 医学部, 客員研究員 (30234256)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 智和 佐賀大学, 医学部, 助教 (60781903)
能城 浩和 佐賀大学, 医学部, 教授 (90301340)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
|
| Keywords | Mieap / MALM / hypoxia / ROS |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
（研究成果）２細胞株：Mieapを発現する胃癌細胞株MKN45およびMieap発現のない胃癌細胞株。MKN45-Mieapノックダウン株：KDおよびコントロールSC株。MKN45は低酸素下にて活性酸素(ROS)産生上昇なく、低癌浸潤能。58As9は低酸素下にてROSが上昇し、高癌浸潤能を示した。MKN45では低酸素下でライソソームのミトコンドリア内侵入が見られ、ミトコンドリア品質管理機構が正常に作動する結果、ROS産生が制御され癌浸潤を抑制していることが推測された。一方、58As9では低酸素下でライソソームのミトコンドリア内侵入は見られず、ミトコンドリア品質管理機構が破綻した結果、ROS上昇し癌浸潤が亢進していると推測された。MKN45の低酸素下ライソソーム侵入がMieapを介して行われていることをKD, SC株を用いて証明した。以上の研究結果をScientific Reportsに投稿し、受理された。
Mieap-induced accumulateon of lysosomes within mitochondria (MALM) regulates gastric cancer cell invasion under hypoxia by suppressing reactive
oxygen species accumulateon. Sci Rep (2019) 9:2822
さらに、R1年度は、MALM機構を保持したMKN45およびMALM機能が失活した58As9株を用いてiTRAQ法にてMKN45が58As9株に比し、発現量が減少するミトコンドリアタンパクを5種類抽出した。これらのタンパク発現を特異抗体でウエスタンブロットを行い、iTRAQ法の結果と照合したが、iTRAQ法とは不一致の結果であった。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
H30年度：申請した研究計画が順調に進み、論文投稿さらには受理まで達成できた。
R１年度：さらに研究内容を進展させるため、iTRAQ法によるプロテオーム解析を行ったが、予想通りの結果を得ることができなかった。
|
| Strategy for Future Research Activity |
R2年度（最終年度）：当初の計画は達成しているため、視点を変更し研究を進める計画を立案した。
（目的と方法）：mieap発現が欠失し、低酸素環境下でのMALM機構が破綻、ROS上昇することで癌浸潤能亢進を発揮する58As9を用いて、MALM破綻が胃癌転移様式の一つである腹膜播種を誘導するか否かにつき、ヌードマウス同所性移植を用いて解析・検討する
|
| Causes of Carryover |
令和２年度では、次年度使用額として8,426円を合算して使用したい。
|
