Near-infrared fluorescence imaging and photodynamic therapy with indocyanine green lactosome has antineoplastic effects for gallbladder cancer

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K08661
• Research Institution: Kansai Medical University
• Principal Investigator: 海堀 昌樹 関西医科大学, 医学部, 教授 (30333199)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石崎 守彦 関西医科大学, 医学部, 講師 (10509467) ; 松井 康輔 関西医科大学, 医学部, 講師 (40460828)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: ICG-ラクトソーム / Photodynamic Therapy / 胆嚢癌

Outline of Annual Research Achievements

In Vitro実験
方法：NOZ細胞(中分化ヒト胆嚢癌細胞株)を2×10 4細胞/100μL培地/ウェルで96個のマルチウェルプレートに播種し、24時間インキュベートした。プレートを、何も添加せずレーザー照射を行わない群(対照群)、ICG-ラクトソームを含まずレーザー照射を行う群(レーザー群)、ICG-ラクトソームを有するがレーザー光をあてない群(ICG-ラクトソーム群)およびICG-ラクトソームを添加しレーザー光をあてる群Photodynamic Therapy(PDT)にわけ実験を行った。翌日、培地を以下のように変更した。コントロールおよびレーザー群はリン酸緩衝食塩水；ICG-ラクトソームおよびPDT群について2mg/mLのICG-ラクトソームを含むPBS(-)。近赤外(810±10nm)レーザー源を用いて、レーザーおよびPDT群を、培地を交換した直後に照射した。レーザーのフルエンス率(mW/cm2)および照射時間は、190mW/cm2および95秒、340mW/cm2および55秒、190mW/cm2および525秒のいずれかの方法で設定した。約18J/cm2または100J/cm2のフルエンスに対応する340mW/cm2および300sである。照射後、各ウェルを新鮮な培地で交換し、0,24,48,72時間インキュベートした。
【照射条件】照射エネルギー密度(J/cm2)及び出力(mW/cm2)の異なる4群　18J/cm2：①高出力⇒340mW/cm2、55秒 ②低出力⇒190mW/cm2、95秒　100J/cm2：③高出力⇒340mW/cm2、300秒 ④低出力⇒190mW/cm2、525秒
【細胞障害】MTT assayを用いて細胞障害度を定量

結果：照射後72時間で、100J/cm2のPDT群とコントロール群では細胞生存率がICG-ラクトソームおよびレーザー群で著しく低下した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

in vitro実験完了し、次にin vivo実験へ進む予定です。

Strategy for Future Research Activity

in vitro実験完了し、次にin vivo実験へ進む予定です。

Causes of Carryover

（理由）
次年度に高額な必要物品を複数購入する可能性があるため、研究費の使用を控えていた。
（使用計画）
必要な消耗品等で使用する予定です。