2020 Fiscal Year Annual Research Report
New strategy of hepatocellular carcinoma treatment using exosomes exocrimned by cancer associated fibroblast
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18K08707
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
原田 昇 九州大学, 大学病院, 講師 (80419580)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
間野 洋平 独立行政法人国立病院機構(九州がんセンター臨床研究センター), その他部局等, 肝胆膵外科医師 (10792244)
副島 雄二 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (30325526)
戸島 剛男 九州大学, 大学病院, 助教 (40608965) [Withdrawn]
本村 貴志 九州大学, 医学研究院, 共同研究員 (50719507)
吉住 朋晴 九州大学, 医学研究院, 准教授 (80363373)
池上 徹 九州大学, 大学病院, 講師 (80432938)
伊藤 心二 九州大学, 大学病院, 助教 (90382423)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | miR-150-3p / CAF / miRNA / Exsome |
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| Outline of Annual Research Achievements |
最終年度における計画ではin vitro及びin vivoマウスモデルでmiRNAやmRNAをノックイン、ノックダウンし、癌の進展浸潤能力を解析、転移モデルでの転移能力を解析し、vivo系の予後を検討することが目標であった。具体的には肝癌細胞株において、マイクロアレイで増強のあったmiRNAやmRNAをCAF細胞において増強減弱させ、エクソソームを抽出し、細胞株に添加してEMTや増殖浸潤能力を解析する計画を予定しており、以下のように遂行した。
実際にはExosomeを癌細胞株に添加し癌細胞への影響について比較した。Exosome-miRNAを網羅的に比較解析し、CAFsでmiR-150-3pが有意に低下していたことを発見した。CAFsにmiR-150-3pを強制発現させ、抽出したexosomeを癌細胞株に添加すると癌進展能が抑制された。データベースを用いてmiR-150-3pのターゲットとなる遺伝子を検索すると、cadherin 2 (CDH2)が特定された。Luciferase reporter assayより、miR-150-3pがCDH2のmRNAにおける3’UTRを直接的に抑制していることが明らかとなった。また、miR-150-3p強制発現により癌細胞株でCDH2タンパク質発現は低下し、CDH2ノックダウン癌細胞株では癌進展が抑制された。肝細胞癌患者血清におけるexosome-miR-150-3p低発現群は、全生存期間において有意な予後不良であることを示した。
（Cancer-associated fibroblasts promote hepatocellular carcinoma progression through downregulation of exosomal miR-150-3p. Eur J Surg Oncol. 2021 Feb;47(2):384-393. Yugawa K, Harada N, et al）
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