2018 Fiscal Year Research-status Report
大腸癌における抗癌剤耐性に関与する薬剤トランスポーターの役割の解明
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18K08712
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
門馬 智之 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (20622335)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齋藤 元伸 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (90611749)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 大腸癌 / SLCトランスポーター / 抗癌剤耐性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
SLCファミリーは細胞膜に存在するトランスポーターであり、近年癌などの悪性腫瘍においてその悪性化に関与する働きがあることが注目されている。細胞膜に存在するもう一つのトランスポーターであるABCファミリーは研究がすすんでおり、とくにMDR1遺伝子は種々の癌で発現が亢進しており、抗癌剤耐性に関与することが知られている。そのため本研究では、SLCファミリー特に、SLC37A1の抗癌剤の耐性をもたらす機序の解明と癌における発現を検討し、さらに、耐性克服をふまえた治療標的としての有用性についても検討する。具体的には
①大腸癌切除検体でのSLC37A1の発現を確認し、臨床病理学的因子との関連解析をおこなう なかでバイオマーカーとしての有用性を検討する。
②大腸癌細胞株を用いてSLC37A1の機能解析、特に細胞増殖や浸潤能といった癌の発生・進展に関与する機能の検討を行う。
③薬剤耐性を乗り越える治療標的としての可能性を探求する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
SLC37A1発現を大腸癌切除検体にて検討し、非癌部に比べて癌部で発現が上昇していることを見いだし、大腸癌での発現亢進例は予後が不良であることを見いだした。
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| Strategy for Future Research Activity |
SLC37A1の大腸癌における発現をmRNAと蛋白の両面からより大規模症例を用いて検討する。大腸癌切除検体からmRNAを抽出し、リアルタイムPCR法にて発現を検討する。FFPE切片を用いた免疫染色にて蛋白発現を検討し、リンパ侵襲・脈管侵襲・遠隔転移といった臨床病理学的因子との相関を検討する。また、予後との相関も検討する。また、SLC37A1の大腸癌での機能は不明なため、大腸癌細胞株を用いての機能解析実験をおこなう。細胞株にてSLC37A1の強制発現ないし抑制をおこない、SLC37A1の発現変動によりもたらされる細胞増殖能や浸潤能の変化、細胞形態の変化をMTTアッセイやコロニーフォーメーションアッセイ等をもちいて観察し、SLC37A1の癌細胞に対する影響を検討する。さらに、SLC37A1が直接関与する因子の同定をもたらす多層的解析の準備を進める。SLC37A1を強制発現ないし抑制した細胞株を用いてマイクロアレイ等による遺伝子発現解析、マイクロRNA解析、メチル化解析等をおこなう。これにより、SLC37A1発現変動に伴う分子生物学的変動を全体的にとらえることができ、その意義を明らかにすることができる。mRNAはエンリッチメント解析（DAVIDやGSEA解析）を用いる予定であるが、アレイ実験同様に外部委託するなど資源と時間の有効活用を心がけることとする。
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| Causes of Carryover |
主に手術検体組織と臨床病理学的因子の収集をおこなったために、使用額が少なかった。当初の予定通り物品費の多くはｍRNA、免疫染色用の備品の購入に用いられる予定である。また、情報収集や解析結果を学会発表する費用や論文として公表する費用に充てられる。
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