大腸癌における抗癌剤耐性に関与する薬剤トランスポーターの役割の解明

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K08712
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 門馬 智之 福島県立医科大学, 医学部, 准教授 (20622335)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 齋藤 元伸 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (90611749)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 大腸癌 / SLC37A1 / 抗癌剤耐性

Outline of Annual Research Achievements

SLCファミリーは細胞膜に存在するトランスポーターであり、近年癌などの悪性腫瘍においてその悪性化に関与する働きがあることが注目されている。細胞膜に存在するもう一つのトランスポーターであるABCファミリーは研究がすすんでおり、とくにMDR1遺伝子は種々の癌で発現が亢進しており、抗癌剤耐性に関与することが知られている。そのため本研究では、SLCファミリー特に、SLC37A1の抗癌剤の耐性をもたらす機序の解明と癌における発現を検討し、さらに、耐性克服をふまえた治療標的としての有用性についても検討する。具体的には
①大腸癌切除検体でのSLC37A1の発現を確認し、臨床病理学的因子との関連解析をおこなう　なかでバイオマーカーとしての有用性を検討する。
②大腸癌細胞株を用いてSLC37A1の機能解析、特に細胞増殖や浸潤能といった癌の発生・進展に関与する機能の検討を行う。
③薬剤耐性を乗り越える治療標的としての可能性を探求する。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

SLC37A1発現を大腸癌切除検体にて検討し、非癌部に比べて癌部で発現が上昇していることを見いだし、大腸癌での発現亢進例は予後が不良であることを見いだした。大腸癌切除検体におけるSLC37A1の発現を免疫染色法にて評価するために抗SLC37A1 抗体を購入し、発現解析に使用できるかどうかの予備的検討をおこなっている。

Strategy for Future Research Activity

SLC37A1の大腸癌における発現をFFPE切片を用いた免疫染色にて検討し、リンパ侵襲・脈管侵襲・遠隔転移といった臨床病理学的因子との相関を検討する。抗体の特異性・再現性が確認され次第、多数例での検討をおこなう。また、SLC37A1 発現と予後との相関も検討する。また、SLC37A1の大腸癌での機能は不明なため、大腸癌細胞株を用いての機能解析実験をおこなう。細胞株にてSLC37A1の強制発現ないし抑制をおこない、SLC37A1の発現変動によりもたらされる細胞増殖能や浸潤能の変化、細胞形態の変化をMTTアッセイやコロニーフォーメーションアッセイ等をもちいて観察し、SLC37A1の癌細胞に対する影響を検討する。さらに、SLC37A1が直接関与する因子の同定をもたらす多層的解析の準備を進める。SLC37A1を強制発現ないし抑制した細胞株を用いてマイクロアレイ等による遺伝子発現解析、マイクロRNA解析、メチル化解析等をおこなう。これにより、SLC37A1発現変動に伴う分子生物学的変動を全体的にとらえることができ、その意義を明らかにすることができる。mRNAはエンリッチメント解析（DAVIDやGSEA解析）を用いる予定であるが、アレイ実験同様に外部委託するなど資源と時間の有効活用を心がけることとする。

Causes of Carryover

昨年度に引き続き手術検体組織と臨床病理学的因子の収集をおこない、さらに、抗SLC37A1抗体を用いての免疫染色の基礎的検討をおこなっていたために、使用額が少なかった。当初の予定通り物品費の多くはｍRNA、免疫染色用の備品の購入に用いられる予定である。また、情報収集や解析結果を学会発表する費用や論文として公表する費用に充てられる。

Research Products

• [Journal Article] microRNA-148a-3p regulates immunosuppression in DNA mismatch repair-deficient colorectal cancer by targeting PD-L1 (2019)
  • Author(s): Ashizawa Mai、Okayama Hirokazu、Ishigame Teruhide、Thar Min Aung Kyi、Saito Katsuharu、Ujiie Daisuke、Murakami Yuko、Kikuchi Tomohiro、Nakayama Yuko、Noda Masaru、Tada Takeshi、Endo Hisahito、Fujita Shotaro、Sakamoto Wataru、Saito Motonobu、Saze Zenichiro、Momma Tomoyuki、Ohki Shinji、Mimura Kosaku、Kono Koji
  • Journal Title: Molecular Cancer Research Volume: 17 Pages: 1403-1413
  • DOI: 10.1158/1541-7786.MCR-18-0831
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prognostic role of ARID1A negative expression in gastric cancer (2019)
  • Author(s): Ashizawa Mai、Saito Motonobu、Min Aung Kyi Thar、Ujiie Daisuke、Saito Katsuharu、Sato Takahiro、Kikuchi Tomohiro、Okayama Hirokazu、Fujita Shotaro、Endo Hisahito、Sakamoto Wataru、Momma Tomoyuki、Ohki Shinji、Goto Akiteru、Kono Koji
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 9 Pages: 6769
  • DOI: 10.1038/s41598-019-43293-5
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] MLH1 germline mutation associated with Lynch syndrome in a family followed for more than 45?years (2019)
  • Author(s): Momma Tomoyuki、Gonda Kenji、Akama Yoshinori、Endo Eisei、Ujiie Daisuke、Fujita Shotaro、Maejima Yuko、Horita Shoichiro、Shimomura Kenju、Saji Shigehira、Kono Koji、Yashima Rei、Watanabe Fumiaki、Sugano Kokichi、Nomizu Tadashi
  • Journal Title: BMC Medical Genetics Volume: 20 Pages: 67
  • DOI: 10.1186/s12881-019-0792-0
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Intestinal Beh?et disease associated with myelodysplastic syndrome accompanying trisomy 8 successfully treated with abdominal surgery followed by hematopoietic stem cell transplantation (2019)
  • Author(s): Asano Tomoyuki、Sato Shuzo、Furuya Makiko Yashiro、Takahashi Hiroshi、Shichishima-Nakamura Akiko、Ohkawara Hiroshi、Fujiwara Tatsuo、Gunji Naohiko、Hashimoto Choichiro、Momma Tomoyuki、Saito Motonobu、Nakano Hiroshi、Watanabe Guy、Temmoku Jumpei、Fujita Yuya、Matsuoka Naoki、Kobayashi Hiroko、Watanabe Hiroshi、et al.
  • Journal Title: Medicine Volume: 98 Pages: e17979～e17979
  • DOI: 10.1097/MD.0000000000017979
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] KRT17 as a prognostic biomarker for stage II colorectal cancer (2019)
  • Author(s): Ujiie Daisuke、Okayama Hirokazu、Saito Katsuharu、Ashizawa Mai、Thar Min Aung Kyi、Endo Eisei、Kase Koji、Yamada Leo、Kikuchi Tomohiro、Hanayama Hiroyuki、Fujita Shotaro、Sakamoto Wataru、Endo Hisahito、Saito Motonobu、Mimura Kosaku、Saze Zenichiro、Momma Tomoyuki、Ohki Shinji、Kono Koji
  • Journal Title: Carcinogenesis Volume: 0 Pages: 0
  • DOI: 10.1093/carcin/bgz192
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Microanatomy of inferior mesenteric artery sheath in colorectal cancer surgery (2019)
  • Author(s): Sakamoto Wataru、Yamada Leo、Suzuki Osamu、Kikuchi Tomohiro、Okayama Hirokazu、Endo Hisahito、Fujita Shotaro、Saito Motonobu、Momma Tomoyuki、Saze Zenichiro、Ohki Shinji、Kono Koji
  • Journal Title: Journal of the Anus, Rectum and Colon Volume: 3 Pages: 167～174
  • DOI: 10.23922/jarc.2019-016
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A subset of patients with MSS/MSI?low?colorectal cancer showed increased CD8(+) TILs together with up?regulated IFN?γ (2019)
  • Author(s): Kikuchi Tomohiro、Mimura Kosaku、Okayama Hirokazu、Nakayama Yuko、Saito Katsuharu、Yamada Leo、Endo Eisei、Sakamoto Wataru、Fujita Shotaro、Endo Hisahito、Saito Motonobu、Momma Tomoyuki、Saze Zenichiro、Ohki Shinji、Kono Koji
  • Journal Title: Oncology Letters Volume: 0 Pages: 0
  • DOI: 10.3892/ol.2019.10953
  • Peer Reviewed / Open Access