臨床応用を目的とした膵癌におけるオメガ3不飽和脂肪酸の抗血管新生効果の検討

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K08713
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 林 祐一 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (60811726)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松尾 洋一 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (40381800) ; 高橋 広城 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (30381792) ; 坪井 謙 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (80592500)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 膵癌 / オメガ3不飽和脂肪酸 / レゾルビン / 血管新生

Outline of Annual Research Achievements

オメガ3不飽和脂肪酸であるEPAやDHAからの代謝産物であるレゾルビンファミリーに着目して研究を開始した．まず，膵癌細胞株に対するレゾルビンの細胞毒性をWST-1アッセイにて検討した．結果は，どの細胞株においても増殖抑制効果を認めなかった．次に，膵癌細胞株BxPC-3に対しレゾルビンで処理を行い，その上清中の血管新生因子VEGFの産生量をELISAにて計測した．結果，培地のみのコントロール群と比較し，レゾルビン100nM，1μMで処理した群でVEGF産生量の低下を認めた．また，100nMよりも1μMでより産生低下していることから，レゾルビンは濃度依存的にVEGF産生低下をきたす可能性が考えられた．その後，培地のみのコントロールではなく，レゾルビンを溶解しているDMSOをコントロールとして同様の検討を行った．結果は，コントロールの0.1%DMSOではVEGF産生低下をきたさなかったのに対し，1%DMSOでVEGF産生の低下を認めた．そのため，前述のレゾルビン1μM（1%DMSOで溶解）の結果は，DMSOによる影響が強いと考えられた．しかし，100nMのレゾルビン（0,1%DMSOで溶解）では，VEGF産生低下を認めるのに対し，コントロールの0,1%DMSOではVEGF産生低下していないことから，DMSOの影響が少ない状況下では，レゾルビンの効果が検証できる可能性が示唆された．
レゾルビンによるVEGFの発現変化を検証するためにqRT-PCRを実施したところ，100nM（0,1%DMSO）のレゾルビンを1時間処理したものにおいて，有意なVEGF発現低下を認めた．

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

レゾルビン処理によるVEGF産生変化をELISAで検証する際に，DMSOの濃度を多様に変更して繰り返し行っていたため，進捗はやや遅れている状況である．

Strategy for Future Research Activity

レゾルビンが実際にNF-κBの活性化または核内移行を阻害しているかを検証するため，EMSAならびに蛍光免疫染色を行う．NF-κBの活性化にTNFαの試用も検討する．他のレゾルビンファミリーでも同様の結果が得られるかも検証していく．