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2018 Fiscal Year Research-status Report

cell-free再生医療の幹細胞エクソソームによる脊髄虚血再灌流障害軽減法開発

Research Project

Project/Area Number 18K08760
Research InstitutionYamaguchi University

Principal Investigator

森景 則保  山口大学, 医学部附属病院, 講師 (50335741)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 上野 耕司  山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30736070)
佐村 誠  山口大学, 医学部附属病院, 診療助教(4日/週) (30773402)
濱野 公一  山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60263787)
Project Period (FY) 2018-04-01 – 2021-03-31
Keywords脊髄虚血再灌流障害 / エクソソーム
Outline of Annual Research Achievements

胸部大動脈瘤に対するステントグラフト内挿術は、脊髄虚血再灌流障害の為に約3-8%の患者に一過性または永久的な下肢麻痺が生じる。本研究では、その下肢麻痺を防ぐ方法として、エクソソームの投与が有用であるか否か検討するものである。エクソソームとは全ての細胞から放出される直径約20~120 nmの脂質二重膜であり、タンパク、mRNA、microRNA等を内包していると報告されている。また、エクソソームは産生細胞の形質を受け継ぐと言われており、本研究では血管新生能が高く、また、比較的扱い易く、移植細胞として安全性が高い間葉系幹細胞由来のエクソソームを用いて研究を実施した。
間葉系幹細胞を無血清培地で培養し、その培養上清からエクソソームを回収する方法を検討した。無血清培地は、CiMSTM-BM(基礎培養液)とCiMSTM-sAF(アニマルフリーサプリメント)(株式会社細胞科学研究所)を用いた。無血清培地で培養した間葉系幹細胞が産生するエクソソームに内包されているタンパクを解析するために、3日間培養したconditioned mediaに含まれる成長因子およびエクソソーム内包されている成長因子をELISAで測定した。conditioned mediaに含まれるエクソソームは、Total Exosome Isolation Reagent (from cell culture media)(Thermo Fisher Scientific)で単離した。無血清培地で培養したエクソソームは、VEGF、HGF、PDGF-BB、Angiopoietin-1等の成長因子を内包していた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

無血清培地で培養した幹細胞由来のエクソソームの単離、および、エクソソームに内包されている成長因子を確認することが出来たため。

Strategy for Future Research Activity

マウス脊髄虚血モデルに対して、エクソソームを投与するタイミングを検討することで、エクソソーム投与が下肢麻痺を防ぐことが可能か検討する。

Causes of Carryover

次年度使用額が生じた理由は、プラスミド作製費が当初の予定額よりも抑えることが出来たためである。この次年度使用額は、翌年年度の実験動物購入費として使用する。

  • Research Products

    (8 results)

All 2018

All Journal Article (8 results) (of which Peer Reviewed: 8 results,  Open Access: 6 results)

  • [Journal Article] Effectiveness of Embolization of Inferior Mesenteric Artery to Prevent Type II Endoleak Following Endovascular Aneurysm Repair: A Review of the Literature2018

    • Author(s)
      Samura M, Morikage N, Mizoguchi T, Takeuchi Y, Nagase T, Harada T, Suehiro K, Hamano K
    • Journal Title

      Ann Vasc Dis.

      Volume: 11(3) Pages: 259-264

    • DOI

      10.3400/avd.ra.18-00064

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Autologous fibroblasts, peripheral blood mononuclear cells, and fibrin glue accelerate healing of refractory cutaneous ulcers in diabetic mice2018

    • Author(s)
      Mizoguchi T, Ueno K, Yanagihara M, Samura M, Kurazumi H, Suzuki R, Morikage N, Hamano K
    • Journal Title

      Am J Transl Res

      Volume: 10(9) Pages: 2920-2928

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Aggressive Decongestion in Limbs with Lymphedema without Subcutaneous Echo-Free Space2018

    • Author(s)
      Suehiro K, Morikage N, Ueda K, Samura M, Takeuchi Y, Nagase T, Mizoguchi T, Hamano K
    • Journal Title

      Ann Vasc Surg

      Volume: 53 Pages: 205-211

    • DOI

      10.1016/j.avsg.2018.04.033

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Midterm Outcomes of Endovascular Aortic Aneurysm Repair with Carbon Dioxide-Guided Angiography2018

    • Author(s)
      Takeuchi Y, Morikage N, Matsuno Y, Nakamura T, Samura M, Ueda K, Harada T, Ikeda Y, Suehiro K, Ito H, Sakata K, Hamano K
    • Journal Title

      Ann Vasc Surg

      Volume: 51 Pages: 170-176

    • DOI

      10.1016/j.avsg.2018.02.036

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Treatment of Cutaneous Ulcers with Multilayered Mixed Sheets of Autologous Fibroblasts and Peripheral Blood Mononuclear Cells2018

    • Author(s)
      Mizoguchi T, Ueno K, Takeuchi Y, Samura M, Suzuki R, Murata T, Hosoyama T, Morikage N, Hamano K
    • Journal Title

      Cell Physiol Biochem

      Volume: 47(1) Pages: 201-211

    • DOI

      10.1159/000489767

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Correlation Between Changes in Extremity Volume and Bioelectrical Impedance in Arm and Leg Lymphedema2018

    • Author(s)
      Suehiro K, Morikage N, Ueda K, Samura M, Takeuchi Y, Nagase T, Mizoguchi T, Nakamura K, Hamano K
    • Journal Title

      Lymphat Res Biol

      Volume: 16(4) Pages: 385-389

    • DOI

      10.1089/lrb.2017.0063

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Venous hemodynamics assessed with air plethysmography in legs with lymphedema2018

    • Author(s)
      Suehiro K, Morikage N, Ueda K, Samura M, Takeuchi Y, Nagase T, Mizoguchi T, Nakamura K, Hamano K
    • Journal Title

      Vasc Med

      Volume: 23(2) Pages: 139-142

    • DOI

      10.1177/1358863X17745372

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Current Status and Perspectives on Pharmacologic Therapy for Abdominal Aortic Aneurysm2018

    • Author(s)
      Yoshimura K, Morikage N, Nishino-Fujimoto S, Furutani A, Shirasawa B, Hamano K
    • Journal Title

      Curr Drug Targets

      Volume: 19(11) Pages: 1265-1275

    • DOI

      10.2174/1389450119666171227223331

    • Peer Reviewed / Open Access

URL: 

Published: 2019-12-27  

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