2018 Fiscal Year Research-status Report
The elucidation and pathophyological function of endothelial micro particles in sepsis
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18K08907
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
齋藤 浩二 東北大学, 大学病院, 准教授 (10359515)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山田 充啓 東北大学, 大学病院, 助教 (00396483)
武井 祐介 東北大学, 大学病院, 助教 (80822890)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 敗血症 / 血管内皮傷害 / 内皮微小粒子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVECs)にLPSやTNF-αに炎症性刺激を加えると、HUVECs細胞膜表面のPECAM、VE-cadherinなど内皮細胞間結合に関与する因子の発現は抑制され、一方でPECAM+EMPs、VE-cadherin+EMPsの培養液中への放出が促された。一方でE-selectin、ICAM、VCAMといった接着分子は濃度依存性に炎症性刺激によりHUVECs細胞膜の発現が増加し、比例するように接着分子を発現しているEMPsの放出が増加した。
敗血症患者のEMPsの動態を把握するために臨床研究を行った。敗血症患者50名（敗血症 17名、敗血症性ショック33名）、ICUに入室した非敗血症患者10名の血漿中のEMPsを継時的に測定した。各種EMPs数は敗血症患者においては非敗血症患者より有意に増加していた。PECAM+EMPs数およびVE-cadherin+EMPs数はday1, 2, 3, 5日の時点で敗血症患者より敗血症性ショック患者で有意に高く、敗血症の重症度を反映する可能性が示唆された。一方で接着分子を発現するEMPsに関しては、day1でのE-selectin+EMPs（p=0.0046）以外は敗血症と敗血症性ショック患者間で有意な差はなかった。
予後に関してはday1, 2のPECAM+EMPs数（p=0.037, 0.048）およびday1のVE-cadherin+EMPs数（p=0.010）のみ死亡群で有意に高かった。接着分子を発現するEMPs数と患者予後に関する関連は見られなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
現在敗血症患者およびコントロール用の非敗血症患者は当初の予想通りの症例数を確保している。また、HUVECsに対する炎症性刺激実験も概ね予定通り進行しているが、予定していた血管透過性とEMPsの関係性については検証できていない。コラーゲン膜に内皮細胞を播種し擬似血管内皮を作成する予定であったが、内皮細胞のmonolayerがうまく形成できていない状況である。
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| Strategy for Future Research Activity |
臨床研究においてはさらなる症例数を確保し、より信頼性の高いデータとしたい。またin-vitro実験では擬似血管内皮形成のための内皮細胞のmonolaer形成が十分ではなかった。そこで播種細胞の数、培養条件を検討しmonolayer形成に最適な条件を確立し、血管透過性実験を完遂させたい。また透過性実験にこだわらず、EMPsの血管内皮細胞に対する作用など実現可能な実験から行っていく予定である。
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| Causes of Carryover |
次年度はHUVECsを用いた血管透過性実験および臨床研究、腹膜炎モデルマウスを用いたin-vivo実験を予定しており、細胞培養試薬、ヒト用、マウス用の試薬が必要になる。
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