2020 Fiscal Year Annual Research Report
The elucidation and pathophyological function of endothelial micro particles in sepsis
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18K08907
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
齋藤 浩二 東北大学, 大学病院, 准教授 (10359515)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山田 充啓 東北大学, 大学病院, 講師 (00396483)
武井 祐介 東北大学, 大学病院, 助教 (80822890)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | マイクロパーティクル / 敗血症 / 内皮傷害 / 血管透過性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
血管透過性とEMPsの関連について検証した。HUVECsを培養したのちに、血管透過性を修飾する因子によるpre-treatmentをしたのちにTNF-αによる炎症性刺激を加え、培地を回収してMPsを精製しフローサイトメーターでPECAM+EMPs, VE-cadherin+EMPs, E-selectin+EMPs, ICAM-1+EMPS, VCAM-1+EMPs数を測定した。血管透過性修飾因子としてangiopoietin-1, VEGF, PGI2を用いた。PECAM+EMPsとVE-cadherin+EMPsはangiopoietin-1とPGI2のpre-treatmentによって放出が有意に抑制され、VEGFのpre-treatmentによって放出を増加させた。一方で接着分子を発現するE-selectin+EMPs, ICAM-1+EMPs, VCAM-1+EMPsの放出は,血管修飾因子のpre-treatmentによって放出量に変化がなかった。
実際に血管透過性修飾因子によってTNF-α刺激による血管透過性が変化したかは、蛍光標識デキストランを用いた透過性試験、TEER（trans-endothelal electronic resitance）試験によって確認した。HUVECsをgelatinコーティングしたトランスウェルで72時間以上培養し、monolayerを形成させた。その後、血管透過性修飾因子によるpre-treatmentとTNF-αによる炎症性刺激を加えたところ、angiopoietin-1とPGI2は有意にTNF-αの透過性亢進を抑制し、VEGFは有意に増強した。
上記の結果より、PECAM+EMPsとVE-cadherin+EMPsは、血管透過性の変化に一致し放出が増減し、血管透過性の指標になり得ることが示された。
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