2018 Fiscal Year Research-status Report
脊髄障害性疼痛におけるCCL21および活性化ミクログリアの動態解析と治療開発
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18K09059
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| Research Institution | University of Fukui |
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Principal Investigator |
平井 貴之 福井大学, 学術研究院医学系部門, 特別研究員 (30569132)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中嶋 秀明 福井大学, 学術研究院医学系部門, 講師 (10397276)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 脊髄損傷 / 神経障害性疼痛 / CCL21 / ミクログリア / マクロファージ / pltマウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
C57BL/6マウス、plt（CCL21欠損）マウスにT9 level にIH impactorを用いて60Kdynの胸髄圧挫損傷モデルを作成した。4日、14日、28日目に疼痛関連評価を行った後、損傷部及び腰膨大部の凍結切片を作成しmicroglia/macrophageのマーカーとしてCD11b、M1マーカーとしてiNOS、M2マーカーとしてCD206を用いて免疫組織学的検討を行った。また同部位のFACS解析にてM1/M2の動態と、hematogenousM1/M2の定量化を行った。また炎症性、抗炎症性サイトカインの発現の評価をWestern blottingを用いて評価した。
疼痛関連評価ではpltマウスはwild typeと比較し疼痛閾値の上昇を認め、経時的な免疫組織学的評価では両群とも損傷部、腰膨大部で14日目をピークにCD11b陽性細胞数は増加しており、phenotypeはM1優位であった。pltマウスではwild typeと比較し、M1が優位に減少している結果が得られた。FACSではM1typeがplt群で少なく、hematogenousなM1typeも少ない傾向であった。各種炎症性サイトカインもplt群で低下している結果が得られた。
M1 typeは炎症性サイトカインを産生することで脊髄損傷後疼痛の増悪に関与しているとの報告がある。またCCL21はM1 type の遊走、microglia活性化によるallodynia誘発に寄与するchemokineとして知られている。本研究のpltマウスでは、損傷部および腰膨大部でのM1 typeの細胞数の低下による炎症性サイトカインの産生の低下が組織障害の程度の減少を生じる事により、below levelでの疼痛関連評価での閾値の上昇が生じている事が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画通りに進捗している
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| Strategy for Future Research Activity |
順調に研究は遂行されており、今後も当初の計画に準じて研究を進めていく予定である。
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| Causes of Carryover |
補助事業の誠実な執行に努めた結果、当初計画より経費の使用が節約できたことにより未使用額が生じた。
当該未使用額を次年度に持ち越して追加の試薬・抗体・消耗品等購入する。
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