2019 Fiscal Year Research-status Report

R-spondin2を通じた変形性関節症の分子機構の解明とその治療薬の応用開発

Research Project

Project/Area Number	18K09062
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	竹上靖彦名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (50755345)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	関泰輔名古屋大学, 医学部附属病院, 病院講師 (20528822) 宮本健太郎名古屋大学, 医学部附属病院, 医員 (50789899) [Withdrawn] 樋口善俊名古屋大学, 医学部附属病院, 医員 (80792738) [Withdrawn]
Project Period (FY)	2018-04-01 – 2021-03-31
Keywords	Wntシグナル / 変形性関節症 / 軟骨代謝
Outline of Annual Research Achievements	昨年度までの検討により、Mianserinが軟骨分化におけるRspo2の働きを抑制することを同定し、軟骨細胞を用い、Rspo2による軟骨細胞の増殖分化がMianserinを投与することでその軟骨分化マーカーが制御されることを明らかとした。ラットによる内側半月板切除モデルを作成し、Mianserinの関節内投与を行ったがMianserinを投与した群はコントロール群と比較して組織学的にOAの進行が抑制されることが明らかとなった。ただしその抑制効果は有意差をもって示される程度ではなかった。そこで、今年度においては、今までの動物実験では十分にOA抑制の結果をえることができたとはならなかったため、新規にRspo2コンディショナルノックアウトマウスを作成し、これを軟骨基質のアグリカン特異的にノックアウトすることによって動物実験を進めることを計画した。Rspo2コンディショナルノックアウトマウスの作成について、先に作成していたアメリカの研究所と連絡をとって進行している。この実験に先行して、関節症モデルが適切に作成されているか、また、評価項目が十分に可能化を検討するために、まずは野生型マウスによる前十字靭帯切断OAモデルをアメリカで作成してもらったものを輸送してもらった。そしてその組織学的評価とマイクロCTによる画像評価を行った。OARSI評価を行い、手術群ではOARSIスコアが有意に高い結果となり、OAモデルが適切に作成できていることを確認した。CTでも軟骨下骨の有意な効果を認めた。現在アグリカン特異的コンディショナルノックアウトマウスについては、現在アメリカにて作成してもらっているものの未だ十分な個体数が確保できていない。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason コンディショナルノックアウトマウスの作成とその個体数の確保が遅れている。具体亭にはRspO2コンディショナルマウスはアメリカの研究所で管理されており、アグリカン特異的コンディショナルノックアウトマウスの優先順位が低く、十分な個体数が確保されないことによる。
Strategy for Future Research Activity	現状のコンディショナルノックアウトマウスの作成の進行状況を鑑みながら動物実験を進行させる。具体的には再度ラットの前十字靭帯切除モデルを作成し、そのモデルに対してMianserinを投与することによる疼痛緩和効果の検討、また炎症由来の変形性関節症モデルを作成し、そのモデルに対するMianserinの効果を見ることによってより臨床に向けた検討を行う予定である。
Causes of Carryover	海外学会への出張を予定していたものの、海外学会が中止となったため。