2021 Fiscal Year Research-status Report
新規RORγ転写共役因子を標的とした去勢抵抗性前立腺癌免疫療法の開発
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18K09162
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
高橋 さゆり 東京大学, 医科学研究所, 特任講師 (40313217)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 隆志 大分大学, 医学部, 教授 (30380520)
中川 徹 帝京大学, 医学部, 教授 (40591730)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 前立腺癌 / ESS2 / RORγ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Naive T cellがhelper T cell 17(Th17)へ分化するにはサイトカインであるIl6、TGF-βと核内受容体RORγ（RAR-related orphan receptor-γt）が必須である。われわれはＴＯＦ－ＭＳにより核内レセプターＲＯＲγの新たな転写共役因子として新規転写共役因子ESS2を同定したため、前立腺癌増悪との関連を調べるため分子細胞学的手法を用い実験を進めた。
【In vitroの実験】
前立腺癌細胞株においてLNCaP、CWR22よりPC3、DU145で高発現していたためPC3、DU145にレンチウイルスを導入ESS2ノックダウン安定株を作成したところ増殖能が低下、細胞形状が著明に変化した。これらのRNAを抽出しGene Set Enrichment Analysisを行った結果、DU145でのESS2ノックダウンにより染色体凝縮、レチノイン酸細胞内応答、染色体分裂、細胞周期制御の遺伝子群が大きく変動した。データベースを利用して前立腺癌組織におけるESS2発現と前立腺癌悪性度の関連を明らかにした。ChIPアッセイにより、ESS2がNFｋB/CHD1のリクルートに影響を及ぼすことを解明した。
【 in vivoの実験】
ＥＳＳ２ノックダウンＰＣ３安定株およびコントロールＰＣ３安定株のペレットを作成しヌードマウスの皮下に移植し、ＥＳＳ２ノックダウンで移植片は全く増殖せずＰＣ３細胞において強力な制癌作用があることを証明した。Cre蛋白によりESS2 exon4-8を欠損させるESS2コンディショナルマウスを作成し前立腺を採取いたところ、顕著な前立腺の低形成を確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
初年度に東京大学から帝京大学へ異動したため基礎研究室の整備から開始したため実験が遅れたが、2年目は前立腺癌細胞株を使ったin vitroの実験に加え、その結果を踏まえ倫理委員会の承認を得てヌードマウスを使用した実験も行い順調に進めることができた。3年目は帝京大学から東京大学医科学研究所附属病院へ異動となり病院共同研究室の1画を借りることになり整備を開始したがCOVID19による影響もあり実験を進めるに至らなかった。４年目病院共同研究室および共通機器室の情報を収集し利用登録し、in vitroの実験を再開することができた。実験環境の整備に時間がかったため遅れてしまったが、現在は順調に進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
当院泌尿器科の手術検体がだいぶ集積されたので、倫理員会を通し患者検体を用いたRNA抽出、発現を検討する予定である。
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| Causes of Carryover |
前記の通り実験が順調に進まなかったため次年度へ繰り越した。
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Research Products
(3 results)
