2020 Fiscal Year Annual Research Report
Novel therapeutic development based on metabolomic analysis to overcome the recurrent ovarian cancer with anti-cancer drug resistance
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18K09217
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| Research Institution | Yamagata University |
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Principal Investigator |
永瀬 智 山形大学, 医学部, 教授 (00292326)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
清野 学 山形大学, 医学部, 助教 (40594320)
太田 剛 山形大学, 医学部, 講師 (50375341)
榊 宏諭 山形大学, 医学部, 客員研究員 (80744458)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 卵巣癌 / メタボローム解析 / 抗がん剤耐性 / PDXオルガノイド / パクリタキセル / アスパラギン代謝経路 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までSCIDマウスを用いて卵巣癌（組織型：小細胞癌）患者から採取した腫瘍細胞をマウスに皮下投与してpatient-derived xenograft (PDX)の作成を行い、さらにオルガノイド培養を用いてPDXで形成された腫瘍細胞をin vitroでの培養することが可能となった。しかしながら、オルガノイド培養によっても細胞の継代が困難であり、解析に用いる細胞株の樹立には至らなかった。そこで今年度は、卵巣癌細胞株を用いて研究を行うこととした。卵巣癌では再発時プラチナ製剤耐性となった症例では、タキサン製剤が治療薬として使用されることが多いためタキサン製剤耐性獲得機序に着目した。卵巣癌細胞株A2780にパクリタキセルを長期暴露させA-PM3細胞株を樹立した。A2780とA-PM3でメタボローム解析を行ったところ、A2780に比較してA-PM3ではアスパラギンの産生が上昇していた。アスパラギンの合成律速酵素としてはアスパラギン合成酵素(ASNS)があり、ASNSの発現をwestern blotting法で検討したところ、A2780と比較してA-PM3ではASNSの発現が増強していた。また、細胞増殖能をMTS assay法で検討したところ、A-PM3ではA2780に比較して細胞増殖能が亢進していた。さらに卵巣癌細胞株10種においてANSの発現を検討したところ、A2780は低発現で、ES-2は高発現であった。両細胞株にアスパラギン阻害剤L-アスパラキナーゼ(LA)を投与して細胞増殖能を検討したところ、A2780に比較してES-2では低濃度のLAで細胞増殖抑制作用を認めた。これらの結果から卵巣癌ではアスパラギン代謝経路がタキサン製剤耐性と細胞増殖能に関与している可能性が示唆された。
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