2019 Fiscal Year Research-status Report
Role of angiogenesis and its inhibition in the surrounding myometrium for the development of uterine leiomyoma
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18K09219
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
石川 博士 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教 (70553973)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
生水 真紀夫 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (30226302)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 子宮筋腫 / 子宮筋 / VEGF |
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| Outline of Annual Research Achievements |
文書にて同意の得られた患者から子宮筋腫、子宮筋層、子宮筋腫周囲筋層を採取し、RNAを抽出後、定量的RT-PCRを施行した。血管内皮増殖因子VEGFの発現を検討した結果、過去の報告とは異なり、VEGFの発現は子宮筋腫周囲筋層で最も高く、次いで子宮筋層で高く、子宮筋腫ではVEGFの発現が子宮筋よりも低下していた。以上の結果から血管新生は子宮筋腫周囲筋層で活発に起こっていることが示唆された。これは子宮筋腫周囲筋層から多くの血流が筋腫核に供給される、という臨床的観察に矛盾しない所見であった。この実験に用いたRNAを用いてRNA-seqによる子宮筋腫周囲筋層の網羅的遺伝子解析を行う準備を進めている。
また昨年度に引き続き、子宮筋腫のマウスxenograftモデルのホルモン投与量、投与方法の検討を行った。申請者らが確立したxenograftモデルにおいて、性ホルモンの注射針を太めのものに変更し、かつ注射後の針穴を瞬間接着剤で閉じることにより、投与ホルモンの漏れを最小限にすることを試みた。この注射方法の改良により、ホルモン剤の体表への漏れがなくなり、xenograftが増大する比率が上昇した。ところが一定の割合で性ホルモンを漏れなく投与しても増大しない筋腫xenograftが存在した。この増大が見られないxenograftを構成する初代子宮筋腫細胞の増殖速度が遅いことを突き止めた。初代培養細胞を用いているため、患者あるいは検体自体の影響を受ける可能性が示唆された。今後は、マウスへの移植片を作成する時点で増殖速度の速い筋腫細胞を使用することにした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
臨床検体の採取に時間を要した。RT-PCRの結果からRNA抽出の時点でRNAが分解されていたことを確認したため、RNA抽出をやり直した。また、マウスxenograftモデルでのホルモン投与方法の条件検討に時間を要した。さらに、年度の後半には、重症免疫不全マウスの供給が不安定となった。
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| Strategy for Future Research Activity |
子宮筋腫、子宮筋腫周囲筋層、正常筋組織の遺伝子発現プロファイルをRNA-seqを用いて、網羅的解析を行い明らかにする。子宮筋腫周囲筋層で活性化しているシグナル伝達経路をGene ontology解析、パスウェイ解析を用いて明らかにする。さらに網羅的解析により明らかになった、個別の遺伝子発現の変化に関して、妥当性を検証する。子宮筋腫マウスxenograftモデルを用いて、子宮筋腫組織単独、子宮筋腫と子宮筋集周囲筋層組織、子宮筋組織を移植した場合の性ステロイドホルモン投与による増大効果を検討する。
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| Causes of Carryover |
学会参加費、旅費が不要であった。
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