Immunosuppressive tumor microenvironment of uterine cervical adenocarcinoma

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K09223
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 尾崎 聡 金沢大学, 保健学系, 助教 (40401921)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 笠島 里美 金沢大学, 保健学系, 准教授 (20444200) ; 中村 充宏 金沢大学, 附属病院, 講師 (50377397)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 癌免疫微小環境 / 子宮頸部腺癌

Outline of Annual Research Achievements

子宮頚部には、Human papillomavirus (HPV) の感染によって扁平上皮癌や腺癌が発生する。近年では、子宮頚部腺癌の発生件数と割合は共に増加傾向にある。腺癌の生物学的特性および臨床挙動は扁平上皮癌とは異なっているが、現在の子宮頚癌治療ガイドラインは両者を区別しておらず、腺癌に着目した発癌・癌進展機構の解明が必要である。一般的に癌は、血管新生や免疫回避を目的として癌微小環境を形成する。しかし、HPV関連癌はウイルスと腫瘍の両方に対する免疫寛容が成立している点で、通常の癌とは異なる。先行研究では、扁平上皮癌が免疫抑制性癌微小環境を構築し、HPV癌蛋白や変異細胞に対する免疫応答を回避して病変を進展させることが示されている。一方、腺癌におけるHPV感染から発癌・癌進展に関わる癌免疫微小環境の動態は不明である。本研究は、腺癌および扁平上皮癌の発生初期から高度進展に至るまでの、各病変の間質組織における免疫細胞群の出現動態を経時的に解析し、その異同を明らかにする。腺癌に特異的な癌微小環境の解明は、腺癌独自の治療戦略構築に資する。
研究初年度においては、過去17年間に渡る132例を抽出した。各症例の代表的パラフィンブロック切片を作製し、リンパ球や組織球を主体とした炎症細胞の種類同定を目的として、12種類の抗体を用いた免疫組織学的染色を施行した。次年度以降では、これらの染色標本のバーチャルスライド化とその画像解析により、腫瘍組織における免疫細胞の種類・個数・局在性を評価し、子宮頸部腺癌の免疫微小環境の特性を明らかにする。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

初年度では、過去17年間にまで遡って、研究対象となる132症例を抽出した。全症例から代表的なパラフィンブロックを１個を選び出し、未染色標本を各症例20枚作製した。病変部に出現する免疫細胞を同定するために、12種類の抗体を用いて計1,584枚の免疫組織化学的染色を行った。現在、これらの標本を評価するために、標本全体のバーチャルスライド化作業の最適化と画像解析アプリケーションの条件設定に取り組んでいる。

Strategy for Future Research Activity

次年度では、初年度に作製した免疫染色標本のバーチャルスライド化と、それを利用した画像解析を行いデータを取得する。また、初年度内に入手できなかった数種類の抗体を入手して、免疫組織化学的染色を追加施行する。集積した免疫細胞動態と臨床病理学的データの多変量解析により、子宮頸部腺癌の癌免疫微小環境の特性を明らかにする。

Causes of Carryover

免疫組織化学的染色に用いる抗体試薬は、長期保存が効かないため実験実施直前に発注している。当該年度末に抗体試薬を発注したが、海外輸入手続きのため納品に3か月以上かかるとのことであり、未使用額が生じた。未使用額と翌年度分を合算した研究費は、今年度中に試薬が入手できず実施できなかった免疫染色の試薬購入と、翌年度から始める追加免疫染色試薬等の購入や学会旅費に充てる予定である。