Establishment of in vitro carcinogenesis model of ovarian low-grade serous carcinoma

2020 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18K09229
• Research Institution: Shimane University
• Principal Investigator: 中山 健太郎 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 准教授 (70346401)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 京 哲 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 教授 (50272969)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 卵巣癌 / 多段階発癌 / がん遺伝子 / がん抑制遺伝子 / 細胞不死化

Outline of Annual Research Achievements

われわれは正常卵管采上皮細胞、卵巣漿液性嚢胞腺腫細胞、子宮内膜症上皮細胞にcyclinD1、CDK4、hTERTの遺伝子導入を行い不死化することに成功した。これらの細胞はそれぞれ、高異型度漿液性癌、低異型度漿液性癌、明細胞癌の発生母体と考えられているが実験的検証はいまだ不十分である。これらの起源細胞にDN-p53、変異型KRAS、変異型PIK3CA、c-myc等の遺伝子導入やARID1Aのノックアウトを行い、ヌードマウスへの移植実験で組織型の検証、癌化に必要な遺伝子異常の数の検討をおこなった。
正常卵管采上皮細胞ではDN-p53＋変異型KRAS＋変異型PIK3CAの3ヒットで高異型度漿液性癌に酷似した組織型がヌードマウス移植実験で確認された。また、卵巣漿液性嚢胞腺腫細胞は変異型KRAS、変異型PIK3CAの2ヒットで低異型度漿液性癌に類似した細胞が確認できた。一方、子宮内膜症上皮細胞ではARID1Aのノックアウトの１ヒットで明細胞癌様の組織を確認することができた。正常卵管采上皮細胞、卵巣漿液性嚢胞腺腫細胞、子宮内膜症上皮細胞は、それぞれ高異型度漿液性癌、低異型度漿液性癌、明細胞癌の発生母体であることが実験的に検証された。正常卵管采上皮細胞を癌化させるには3ヒットが必要であったが、卵巣漿液性嚢胞腺腫細胞、子宮内膜症上皮細胞はそれぞれ2ヒット、1ヒットで癌化が確認され、良性腫瘍は正常組織細胞に比べると癌化の階段を上った状態であることが示唆された。そこで卵巣漿液性嚢胞腺腫細胞、子宮内膜症上皮細胞の全エクソン解析を行い、がん遺伝子、がん抑制遺伝子の異常について検討したが、いずれの細胞にもactionable変異は存在しなかった。これら良性細胞にはエピゲノム異常が存在する可能性が考えられた。現在、卵巣漿液性嚢胞腺腫細胞、子宮内膜症上皮細胞のエピゲノム異常を網羅的に解析中である。

Research Products

• [Journal Article] Whole-Exome Sequencing of Rare Site Endometriosis-Associated Cancer. (2021)
  • Author(s): Kurose S, Nakayama K, Razia S, Ishikawa M, Ishibashi T, Yamashita H, Sato S, Sakiyama A, Yoshioka S, Kobayachi M, Nakayama S, Otsuki Y, Ishikawa N, Kyo S.
  • Journal Title: Diseases (Basel, Switzerland) Volume: 9 Pages: 14
  • DOI: 10.3390/diseases9010014
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pregnancy by Assisted Reproductive Technology Is Associated with Shorter Telomere Length in Neonates. (2020)
  • Author(s): Minamoto T, Nakayama K, Ishibashi T, Ishikawa M, Nakamura K, Yamashita H, Shanta K, Mahmud HM, Razia S, Iida K, Nakamura T, Kanda H, Kyo S.
  • Journal Title: International journal of molecular sciences Volume: 21 Pages: 9688
  • DOI: 10.3390/ijms21249688
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Prevalence and Associated Factors of Malnutrition and Sarcopenia in a Daycare Facility: A Cross-Sectional Study. (2020)
  • Author(s): Shiota A, Nakayama N, Saito Y, Maeda T, Maeda Y, Nakayama K.
  • Journal Title: Healthcare (Basel, Switzerland) Volume: 8 Pages: 576
  • DOI: 10.3390/healthcare8040576
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Nucleus Accumbens-Associated Protein 1 Binds DNA Directly through the BEN Domain in a Sequence-Specific Manner. (2020)
  • Author(s): Nakayama N, Sakashita G, Nagata T, Kobayashi N, Yoshida H, Park SY, Nariai Y, Kato H, Obayashi E, Nakayama K, Kyo S, Urano T.
  • Journal Title: Biomedicines Volume: 8 Pages: 608
  • DOI: 10.3390/biomedicines81206
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Pathological findings in the endometrium after microwave endometrial ablation. (2020)
  • Author(s): Nakayama K, Sultana R, Ishibashi T, Ishikawa M, Yamashita H, Nakamura K, Sawada K, Yoshimura Y, Tatsumi N, Kurose S, Minamoto T, Iida K, Ishikawa N, Kyo S
  • Journal Title: Scientific reports Volume: 10 Pages: 20766
  • DOI: 10.1038/s41598-020-77594-x
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Mucinous borderline ovarian tumors with BRAFV600E mutation may have low risk for progression to invasive carcinomas. (2020)
  • Author(s): Ohnishi K, Nakayama K, Ishikawa M, Ishibashi T, Yamashita H, Nakamura K, Minamoto T, Iida K, Razia S, Ishikawa N, Kyo S
  • Journal Title: Archives of gynecology and obstetrics Volume: 302 Pages: 487 495
  • DOI: 10.1007/s00404-020-05638-8
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Prognostic Value of Peripheral Blood Lymphocyte Telomere Length in Gynecologic Malignant Tumors. (2020)
  • Author(s): Shanta K, Nakayama K, Ishikawa M, Ishibashi T, Yamashita H, Sato S, Sasamori H, Sawada K, Kurose S, Mahmud HM, Razia S, Iida K, Ishikawa N, Kyo S
  • Journal Title: Cancers Volume: 12 Pages: 1469
  • DOI: 10.3390/cancers12061469
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 稀少部位子宮内膜症の悪性転化例における発癌ドライバー遺伝子の検討 (2021)
  • Author(s): 黒瀬 苑水, 中山 健太郎, 石川 雅子, 石橋 朋佳, 山下 瞳, 笹森 博貴, 澤田 希代加, 佐藤 誠也, 太田 啓明, 安藤 正明, 崎山 明香, 吉岡 信也, 小林 光紗, 中山 理, 大月 寛郎, 京 哲
  • Organizer: 日本婦人科腫瘍学会
• [Presentation] 急激な進行を認めた再発卵巣粘液性境界悪性腫瘍の一例 (2021)
  • Author(s): 辰巳 渚, 中山 健太郎, 石川 雅子, 石橋 朋佳, 山下 瞳, 笹森 博貴, 澤田 希代加, 黒瀬 苑水, 佐藤 誠也, 青木 昭和, 京 哲
  • Organizer: 日本婦人科腫瘍学会
• [Presentation] BRCA2遺伝子の生殖細胞系列変異を認めた卵巣粘液性癌の一例 (2021)
  • Author(s): 澤田 希代加, 中山 健太郎, 佐藤 誠也, 黒瀬 苑水, 中村 秋穂, 笹森 博貴, 山下 瞳, 石橋 朋佳, 石川 雅子, 京 哲
  • Organizer: 日本婦人科腫瘍学会
• [Presentation] CARG scoreを用いた高齢者の化学療法有害事象発生リスクの検討 (2021)
  • Author(s): 笹森 博貴, 中山 健太郎, 石橋 朋佳, 黒瀬 苑水, 澤田 希代加, 中村 秋穂, 山下 瞳, 原 友美, 佐藤 絵美, 石川 雅子, 佐藤 誠也, 折出 亜希, 皆本 敏子, 金崎 春彦, 京 哲
  • Organizer: 日本婦人科腫瘍学会
• [Presentation] 卵巣高異型度漿液性癌における多段階腫瘍形成の統合マルチオミックス解析 (2020)
  • Author(s): 同前 愛, 小松 正明, 町野 英徳, 中村 康平, 金子 修三, 生水 貫人, 浅田 健, 千代田 達幸, 中山 健太郎, 青木 大輔, 京 哲, 浜本 隆二
  • Organizer: 日本癌学会
• [Remarks] 島根大学産婦人科 婦人科腫瘍研究室
  • URL: http://www.shimane-u-obgyn.jp/study/837