2018 Fiscal Year Research-status Report
子宮内膜脱落膜化における C/EBPbによるゲノムワイドヒストン制御機構の解明
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18K09230
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
田村 功 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (40610663)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 子宮内膜間質細胞 / 脱落膜化 / PGC-1α |
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| Outline of Annual Research Achievements |
子宮内膜間質細胞の脱落膜化では、ゲノムワイドな遺伝子発現変化とエピジェネティックな変化 (H3K27ac 修飾の上昇) が起こる。我々はこれまでに、転写因子 CCAAT/enhancer-binding proteinb (C/EBPb) がこれらの変化を制御していることを見出してきた。本研究では、C/EBPbがどのように H3K27ac 修飾をゲノムワイドに制御しているかを解明することを目的とした。Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1 alpha (PGC-1a) は、promoter や enhancer に結合することで H3K27ac 修飾を誘導する epigenetic factor であり、脱落膜化においてはその発現が C/EBPβによって制御される。よって、C/EBPbは 、PGC-1aの発現を制御することでゲノムワイドな H3K27ac を調節していると考え検討をおこなった。まず、PGC-1a遺伝子には、第 2 イントロンに存在する enhancer 領域に C/EBPb の結合配列が存在することをすでに見出している。その領域に、cAMP 刺激により実際に C/EBPbが結合するかを chromatin immunoprecipitation (ChIP) assay を用いて証明した。また、同部位の転写活性をLuciferase assay で証明した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
C/EBPβによるPGC-1αの調節機構が詳細に解明できているから。
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| Strategy for Future Research Activity |
ゲノム編集法を用いてPGC-1αのenhancer領域を欠失させた細胞を作成し、enhancer活性を検討する。さらに、PGC-1αのtarget遺伝子を同定し、実際にPGC-1αがそれらの遺伝子発現に関与するかをPGC-1αをノックダウンすることで検討する。
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| Causes of Carryover |
本年度の実験内容に変更はなかったが、当初予定していた実験試薬の変更により、760959円未使用額が生じた。この未使用額については平成31年度の実験試薬の購入に充てる。
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Research Products
(2 results)
