分娩時オキシトシン投与モデルマウスの脳細胞障害と発達障害

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K09237
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 板倉 敦夫 順天堂大学, 医学部, 教授 (70262897)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 平山 貴士 順天堂大学, 医学部, 助手 (20816962) ; 小池 正人 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80347210)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: オキシトシン / 脳障害 / マウス

Outline of Annual Research Achievements

C57BL/6J mice (WT)の妊娠マウス（18.5日）の皮下に、各種濃度（0.6, 6，18，240マイクログラム)のオキシトシン水溶液を浸透圧ポンプの埋め込みを行い、通常どおり経腟分娩させたのちに生存新生仔数をカウントし、生存新生仔の脳を摘出した。この脳組織を用いてどのような障害が発生しているのかを、領域別、また構成する細胞種（ニューロン・各種グリア細胞）別に免疫組織染色および定量PCRを用いて評価した。オキシトシン6マイクログラム投与マウスでは、生存新生仔数は対象と有意差がなかったが、18マイクログラム以上を投与したマウスでは、生存新生仔が減少した。定量PCRでは、生後0, 5日目に安楽死後に脳を摘出し、脳細胞の最初期遺伝子であるc-fos, c-Jun, JunBのmRNAの発現を確認したが、6マイクログラム以上の投与でその発現は有意に増加していた。マウス出生直後の前頭前野(PFC)、手綱核(Hb)、室傍核(PVN)におけるTUNEL陽性細胞数を免疫組織染色で確認したところ、やはり6マイクログラム以上でオスマウスに限って増加を認めた。しかし、他の領域では、これら遺伝子のmRNA発現量は有意差を認めなかった。母獣への6マイクログラムのオキシトシン投与は、胎仔・新生仔の死亡は増加させなかったが、脳局所におけるc-fos, c-Jun, JunBの発現、TUNEL細胞増加を示したことから、母獣オキシトシン負荷マウスは、胎仔脳障害発生モデルとなりうることが示された。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

先行研究と飼育環境を同様にしたが、先行研究でみられた結果を一部再現できなかった。

Strategy for Future Research Activity

飼育環境の変更、マウス種別の変更などで、先行研究の再現性を求めつつ、現在得られている結果から、さらなる知見を見出すことを進める。

Causes of Carryover

研究計画の若干の遅れにより、平成30年度使用予定の試薬を購入できず、平成31年度（令和元年度）に使用する。