2020 Fiscal Year Annual Research Report
The oncogenic role of PD-Li in cervical cancer
| Project/Area Number |
18K09278
|
|---|
| Research Institution | Hokkaido University |
|---|
Principal Investigator |
董 培新 北海道大学, 医学研究院, 特任助教 (50602504)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
|
| Keywords | 子宮頸癌 / PD-L1 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
研究計画に基づき、miR-18a発現制御に関わる上流分子の同定と機構の解析を中心に研究を展開した。我々独自の解析では、miR-18a遺伝子のプロモーター領域配列には、OCT4、STAT3、E2F1などの複数の転写因子の結合配列領域が含まれている。これらの潜在的調節因子の発現を変化させ、miR-18a発現変化をRealtime PCR法で確認することで、OCT4はmiR-18a転写の活性化に関わる正の転写因子として機能することが判明した。そして転写因子OCT4とmiR-18a遺伝子プロモーター領域との結合能をクロマチン免疫沈降法により分析したことによって、OCT4はmiR-18a遺伝子のプロモーター領域への直接的な結合を実験的に証明した。また、miR-18a遺伝子プロモーター配列を含むルシフェラーゼベクターを作製して、OCT4の発現ベクターと同時に頸癌細胞に導入して、ルシフェラーゼアッセイによって、miR-18a遺伝子の転写活性の亢進に関わる上流促進分子としてOCT4を同定した。更に転写因子OCT4の結合領域に変異を加えたルシフェラーゼコンストラクトを作製し、転写因子OCT4のゲノムDNA上の結合部位を同定した。以上の研究によって、PD-L1遺伝子は癌促進因子として働き、頸癌細胞の増殖及び浸潤などの悪性形質を著しく促進することを明らかにした。そしてmiR-140、miR-142、miR-340及びmiR-383はPD-L1に直接結合しその発現を抑制することで、体癌細胞の悪性形質を抑制することも明らかになった。また転写因子OCT4の発現増加は、PD-L1の制御に関わる癌促進的miR-18aの過剰発現を招き、下流にあるPI3K/AKT、RAS/MAPK及びSTAT3経路を活性化し、p53経路の動きを抑えることで、頸癌におけるPD-L1の高発現を引き起こすという重要な成果が得られている。本研究により得られた知見は、今後頸癌の根絶を目指す基層研究の発展及び新しい治療法の開発に大きく貢献していると考えられる。
|
