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2018 Fiscal Year Research-status Report

Establishment of immunohistological method to improve the diagnostic accuracy of partial hydatidiform moles

Research Project

Project/Area Number 18K09281
Research InstitutionChiba University

Principal Investigator

碓井 宏和  千葉大学, 大学院医学研究院, 講師 (90375634)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 佐藤 明日香  千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (60779859)
Project Period (FY) 2018-04-01 – 2021-03-31
Keywords胞状奇胎 / 発現マイクロアレイ / 定量的PCR法 / 免疫染色 / グロビン遺伝子
Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、遺伝学的部分奇胎と流産を確実に鑑別可能にする免疫染色法の確立である。
1)部分奇胎特異遺伝子候補をスクリーニングとして、遺伝学的診断が確定している遺伝学的全奇胎・部分奇胎・流産の絨毛組織(各4検体、合計12検体)からRNAを抽出し、発現マイクロアレイ解析(イルミナ社 HT-12 v4.0)を行った。流産絨毛で高発現、部分奇胎と全奇胎で低発現の遺伝子として、HBE1、HBZ、HBG1、HBG2が抽出された。
2) 定量的PCR法で当該遺伝子の発現に差があるか確認を行った。HBE1とHBZは、流産絨毛では高発現、部分奇胎・全奇胎では検出感度ぎりぎりの発現であった。
3)部分奇胎特異遺伝子産物に対する特異抗体を用いた免疫染色による評価を開始した。市販の入手可能な抗体があるHBGについて、全奇胎・部分奇胎・流産のホルマリン固定パラフィン包埋切片を用いて、免疫染色による評価を行った(全奇胎40例、部分奇胎20例、流産20例)。流産絨毛の胎児赤血球が抗HBG抗体により全検体が染色されたが、一部の部分奇胎の検体でも染色された検体を認めた。HBE1とHBZに対する、特異的な抗体が入手不可能なため、ポリクローナル抗体(ウサギ)を作成した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

発現アレイ解析が終了し、マイクロアレイのデータ解析は、フリーソフトであるRソフトウェア(https://www.r-project.org)を用いて、様々な視点から検証できた。免疫染色法の確立に必須である特異性の高い抗体が市販抗体の中に見つけることができなかったが、ポリクローナル抗体を受託作成し既に入手している。

Strategy for Future Research Activity

前年度に作成したポリクローナル抗体(抗HBE1抗体、抗HBZ抗体)を用いて、鑑別可能か検証を進める。

Causes of Carryover

発現アレイ解析の受託費用を主として予算計上していた。1度目の発現アレイ解析セットにより、クオリティが担保されたデータが取得できない可能性を考え、2回分のアレイ解析費用を計上していたが、1回のアレイ解析で十分なデータが得ることができた。また、アレイデータのデータ解析は、フリーソフト(R言語)を用いたことにより、費用が全くかからなかったため、当該年度の使用額が予定より少なくなった。次年度には、当初予定していなかった組織アレイを作成することにより、多検体の標本に対する免疫染色を行うことで臨床応用への検証を進める。

  • Research Products

    (21 results)

All 2019 2018

All Journal Article (9 results) (of which Peer Reviewed: 9 results) Presentation (12 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Radiation Therapy for Extrapelvic Lymph Node Recurrence After Curative Treatment for Cervical Cancer2019

    • Author(s)
      UNO TAKASHI、KANAZAWA AKI、NEMOTO MIHO WATANABE、HARADA RINTARO、KOBAYASHI HIROKI、SAITO MAKOTO、IWAI YUMA、USUI HIROKAZU、MITSUHASHI AKIRA、SHOZU MAKIO
    • Journal Title

      Anticancer Research

      Volume: 39 Pages: 891~895

    • DOI

      10.21873/anticanres.13190

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Variant Prolactin Receptor in Agalactia and Hyperprolactinemia2018

    • Author(s)
      Kobayashi Tatsuya、Usui Hirokazu、Tanaka Hirokazu、Shozu Makio
    • Journal Title

      New England Journal of Medicine

      Volume: 379 Pages: 2230~2236

    • DOI

      10.1056/NEJMoa1805171

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Response to Letter to ‘Removal of retained products of conception showing marked vascularity without uterine artery embolization: Two case reports’2018

    • Author(s)
      Usui Hirokazu、Sato Asuka、Shozu Makio
    • Journal Title

      Journal of Obstetrics and Gynaecology Research

      Volume: 45 Pages: 487~487

    • DOI

      10.1111/jog.13857

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Removal of retained products of conception showing marked vascularity without uterine artery embolization: Two case reports2018

    • Author(s)
      Usui Hirokazu、Sato Asuka、Okayama Jun、Suzuki Yoshiya、Omoto Akiko、Shozu Makio
    • Journal Title

      Journal of Obstetrics and Gynaecology Research

      Volume: 44 Pages: 1482~1486

    • DOI

      10.1111/jog.13678

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Gestational Trophoblastic Neoplasia From Genetically Confirmed Hydatidiform Moles: Prospective Observational Cohort Study2018

    • Author(s)
      Usui Hirokazu、Qu Jia、Sato Asuka、Pan Zijun、Mitsuhashi Akira、Matsui Hideo、Shozu Makio
    • Journal Title

      International Journal of Gynecologic Cancer

      Volume: 28 Pages: 1772~1780

    • DOI

      10.1097/IGC.0000000000001374

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Elucidation of the developmental mechanism of ovarian mature cystic teratomas using B allele-frequency plots of single nucleotide polymorphism array data2018

    • Author(s)
      Usui Hirokazu、Nakabayashi Kazuhiko、Kaku Hiroshi、Maehara Kayoko、Hata Kenichiro、Shozu Makio
    • Journal Title

      Genes, Chromosomes and Cancer

      Volume: 57 Pages: 409~419

    • DOI

      10.1002/gcc.1

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Treatment results of the second-line chemotherapy regimen for patients with low-risk gestational trophoblastic neoplasia treated with 5-day methotrexate and 5-day etoposide2018

    • Author(s)
      Kanno Toshiyuki、Matsui Hideo、Akizawa Yoshika、Usui Hirokazu、Shozu Makio
    • Journal Title

      Journal of Gynecologic Oncology

      Volume: 29 Pages: e89~e89

    • DOI

      10.3802/jgo.2018.29.e89

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Bacterial-Culture-Negative Subclinical Intra-Amniotic Infection Can Be Detected by Bacterial 16S Ribosomal-DNA?Amplifying Polymerase Chain Reaction2018

    • Author(s)
      Morimoto Sachi、Usui Hirokazu、Kobayashi Tatsuya、Katou Eiji、Goto Shunji、Tanaka Hirokazu、Shozu Makio
    • Journal Title

      Japanese Journal of Infectious Diseases

      Volume: 71 Pages: 274~280

    • DOI

      10.7883/yoken.JJID.2017.468

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 胞状奇胎自然寛解後の妊娠予後2018

    • Author(s)
      佐藤 明日香, 碓井 宏和, 生水 真紀夫
    • Journal Title

      産婦人科の実際

      Volume: 67 Pages: 895~900

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 絨毛性疾患に対するDNA診断とその応用2018

    • Author(s)
      碓井 宏和, 生水 真紀夫
    • Organizer
      第57回 日本臨床細胞学会秋季大会
    • Invited
  • [Presentation] 思春期・小児期のヒト骨組織からのアロマターゼ活性の検出2018

    • Author(s)
      碓井 宏和, 西須 孝, 生水 真紀夫
    • Organizer
      第26回日本ステロイドホルモン学会学術集会
  • [Presentation] Dilatation and evacuation for retained products of conception with hypervascularity without uterine artery embolization2018

    • Author(s)
      Asuka Sato, Hirokazu Usui, Jun Okayama, Akiko Omoto, Yoshiya Suzuki, Makio Shozu
    • Organizer
      International Federation of Placenta Associations 2018 Conference
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Risk factors of post-molar gestational trophoblastic neoplasia: prospective observational cohort study2018

    • Author(s)
      Hirokazu Usui, Asuka Sato, Zijun Pan, Makio Shozu
    • Organizer
      International Federation of Placenta Associations 2018 Conference
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] LAEVERIN AS A POSSIBLE MARKER OF PSTT2018

    • Author(s)
      Hiroshi Fujiwara, Kyosuke Kagami, Masamori Ono, Hirokazu Usui
    • Organizer
      International Federation of Placenta Associations 2018 Conference
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Application of DNA polymorphisms for gestational trophoblastic disease2018

    • Author(s)
      Hirokazu Usui, Asuka Sato, Zijun Pan, Makio Shozu
    • Organizer
      International Federation of Placenta Associations 2018 Conference
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] GESTATIONAL TROPHOBLASTIC NEOPLASIA FROM CYTOGENETIC HYDATIDIFORM MOLES: PROSPECTIVE OBSERVATIONAL COHORT STUDY2018

    • Author(s)
      Hirokazu Usui, Asuka Sato, Zijun Pan, Makio Shozu
    • Organizer
      17th Biennial Meeting of the International Gynecologic Cancer Society
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 中期中絶後に生じた子宮内血管病変からの一時的止血にバルン圧迫術が奏功した1例2018

    • Author(s)
      岡山潤, 尾本暁子, 佐藤明日香, 碓井宏和, 生水真紀夫
    • Organizer
      第54回日本周産期・新生児医学会学術集会
  • [Presentation] 血流を伴う妊娠組織遺残に対する子宮内容除去術の治療成績2018

    • Author(s)
      佐藤 明日香, 碓井 宏和, 岡山 潤, 鈴木 義也, 尾本 暁子, 生水 真紀夫
    • Organizer
      第54回日本周産期・新生児医学会学術集会
  • [Presentation] 血流著明な絨毛遺残に対して最大ラミナリア法を適用した1例:動脈塞栓術回避への戦略2018

    • Author(s)
      碓井宏和, 佐藤明日香, 岡山潤, 鈴木義也, 尾本暁子, 生水真紀夫
    • Organizer
      第54回日本周産期・新生児医学会学術集会
  • [Presentation] Analysis of paternal contribution of genetic partial hydatidiform moles using subtraction B allele frequency plotting of SNP array2018

    • Author(s)
      Hirokazu Usui, Asuka Sato, Makio Shozu
    • Organizer
      70th Annual Congress of Japan Society of Obstetrics and Gynecology
  • [Presentation] Prognostic effect of ABO blood groups in patients with androgenetic complete hydatidiform moles2018

    • Author(s)
      Asuka Sato, Hirokazu Usui, Zijun Pan, Yuji Habu, Ayumu Matsuoka, Kyoko Nishikimi, Shinichi Tate, Akira Mitsuhashi, Makio Shozu
    • Organizer
      70th Annual Congress of Japan Society of Obstetrics and Gynecology

URL: 

Published: 2019-12-27  

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