2018 Fiscal Year Research-status Report

蝸牛の恒常性・形態形成におけるプロサポシンの機能的意義の解明

Research Project

Project/Area Number	18K09375
Research Institution	Gifu University
Principal Investigator	齋藤正一郎岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (60325371)
Project Period (FY)	2018-04-01 – 2021-03-31
Keywords	プロサポシン / GPR37 / GPR37L1 / 蝸牛 / 神経栄養因子
Outline of Annual Research Achievements	約520アミノ酸残基からなるタンパク質プロサポシンは，細胞質内ではリソソーム内における糖脂質分解の補酵素として機能しているほか，細胞外液中にも豊富に存在し，神経栄養因子として機能していることが明らかとなっている。聴覚系において，プロサポシンの先天性異常は蝸牛の形態異常を伴う著しい難聴を引き起こす。一方，神経栄養因子プロサポシンに対するレセプター，GPR37ならびにGPR37L1の同定は最近であるため，蝸牛におけるそれらの発現性は未だ検討がなされていない。そのため，なぜ蝸牛の恒常性にプロサポシンが必須なのか，決定打を欠く状況となっている。本研究は，聴覚障害治療におけるプロサポシンの応用への貢献を目的とする基礎的研究であり，正常および損傷治癒過程の蝸牛におけるプロサポシンレセプターの発現性を明らかにするとともに，発生過程の蝸牛におけるそれらの発現性の比較も加え，蝸牛の恒常性・形態形成におけるプロサポシンの機能的意義を明らかにすることを目的とする。本年度は，マウスの蝸牛におけるGPR37，GPR37L1およびプロサポシンの発現様式について解析を進めた。マウス蝸牛よりcDNAを作製し，各々の分子に対する特異的プライマーを用いてその発現性について解析を行った。結果，GPR37およびGPR37L1の両方の蝸牛における発現性が認められた。プロサポシンについては，９塩基短いプロサポシンのalternative splicing formのみが検出された。中枢神経系では9塩基の挿入があるものとないものの両タイプの発現が認められるため，蝸牛においては特定のタイプのプロサポシンのみ活用されている可能性がある。聴覚障害治療におけるプロサポシンの応用を考える上で有用な知見が得られた。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 病態におけるプロサポシンならびにそのレセプターの役割の解明に向けて，まず正常時におけるこれら分子の発現性を明らかにしなくてはならないが，現時点では正常時のこれら分子の発現性について順調に結果が得られている。
Strategy for Future Research Activity	計画通り，まず正常時における分子発現をin situ hybridizationならびに免疫組織化学的染色で明らかにする。次に病態モデルを作製し，分子発現の変化について明らかにする。