２光子励起顕微鏡を用いた網膜および視神経疾患における眼球深部動態観察

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K09408
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 臼井 審一 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (20546882)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松下 賢治 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (40437405)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 2光子励起顕微鏡 / アストロサイト / 視神経 / 網膜

Outline of Annual Research Achievements

マウス網膜および視神経の生体観察のための条件検討をさらに行った。野生型マウスを用いて、核染色、血管染色、アストロサイトのマーカーを主に用い、薬剤の投与量を再度検討した。多光子励起顕微鏡を用いた眼球深部生体観察系を確立するため、マウス眼球深部観察用として専用固定台をさらに改良し、全身麻酔や体温、固定台の温度調節、心拍数のモニタリングを行った上で目的の蛍光色素の注入して、視神経乳頭付近のオリエンテーション、乳頭内及び周囲血管の同定、またアストロサイトの生体染色に複数回成功した。ただ、視神経乳頭付近のオリエンテーションは時に難しいこともあり、更なる検討を必要とした。一方で、高眼圧モデルマウスの作成を行い、短期および中期的な眼圧変動と形態変化を継時的に確認した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

野生型マウスを用いた網膜および視神経のin vivo imagingに成功している。また、前房内gelを用いた高眼圧モデルの作成に成功している。しかし、動物舎の閉鎖や新型コロナ蔓延のため、動物実験が制約され、実験に支障を来している。

Strategy for Future Research Activity

高眼圧モデルの詳細な解析を行い、更なる条件検討を行う。高眼圧モデルと正常眼圧マウスにおけるアストロサイトの動態を中心に、２光子励起顕微鏡を用いて生体で比較する。

Causes of Carryover

新型コロナ感染拡大の影響で、動物実験に制限がかかり、当初の計画が遅れたため。