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2019 Fiscal Year Research-status Report

テネイシンXーTRPチャネル系を標的とした神経麻痺性角膜症の新規治療戦略の確立

Research Project

Project/Area Number 18K09419
Research InstitutionWakayama Medical University

Principal Investigator

住岡 孝吉  和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (40433362)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 雑賀 司珠也  和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (40254544)
岡田 由香  和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (50264891)
山中 修  和歌山県立医科大学, 医学部, 博士研究員 (50254545)
平井 秀一  和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (80228759)
松本 健一  島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 教授 (30202328)
小出 隆規  早稲田大学, 理工学術院, 教授 (70322253)
Project Period (FY) 2018-04-01 – 2023-03-31
KeywordsテネイシンX / 角膜上皮創傷治癒
Outline of Annual Research Achievements

【目的】テネイシンX(TNX)欠失(KO)マウスでは角膜上皮創傷治癒過程で角膜上皮欠損の閉鎖が12時間後、18時間後、24時間後で有意に著明に遅延するが、角膜知覚神経構築への関与は免疫染色では確認されなかったことを昨年報告した。本年は遅延の機序解明を目的として継続した研究結果を報告する。
【対象と方法】C57BL/6(WT:n=46)およびKO(n=46)マウスを使用し、片眼に直径2mmの角膜上皮欠損モデルを作製。角膜よりRNAを抽出し、MPO(好中球)、F4/80(マクロファージ)、IL-6、TGFβ1(炎症性サイトカイン)、NGF(神経成長因子)、Substance P(神経ペプチド)をreal time RT-PCRで比較検討した。また上皮遊走に関与するリン酸化p38、MMP2、MMP9をウエスタンブロットで比較検討した。
【結果】MPO、F4/80のmRNA発現はKOでは6時間後にKO角膜で有意に上昇していた。IL-6、TGFβ1、NGF、Substance P の発現は創傷治癒経過中に有意な差異が観察されなかった。ウエスタンブロットでのMMP2の発現はKOでは6時間後、12時間後で抑制されていたが、リン酸化p38、MMP9の発現には差はみられなかった。
【結論】KOマウスの角膜上皮創傷治癒の遅延には好中球の浸潤とMMP2の発現が関与している可能性がある。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の予定通り、TNX欠失マウスが生まれ次第順次実験を遂行している。

Strategy for Future Research Activity

TNX-KOマウスの角膜上皮創傷治癒の遅延には好中球の浸潤が関与している可能性が判明しため、好中球枯渇剤を使用して、好中球減少による角膜上皮遅延のレスキューが可能かどうか探索予定である。

Causes of Carryover

実験計画遂行にあたり当教室の在庫試薬を使用できたため計画より使用額が少なかった。

  • Research Products

    (3 results)

All 2020 2019

All Journal Article (1 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Effects of a prostaglandin F2alpha derivative glaucoma drug on EGF expression and E-cadherin expression in a corneal epithelial cell line.2020

    • Author(s)
      Takada Y, Yamanaka O, Okada Y, Sumioka T, Reinach PS, Saika S.
    • Journal Title

      Cutan Ocul Toxicol.

      Volume: 6 Pages: 1-8

    • DOI

      10.1080/15569527.2020.1722152.

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] Impairment of cornea epithelial wound healing in a Tenasin X-deficient mouse.2019

    • Author(s)
      Sumioka T, Okada Y, Iwanishi H, Yamanaka O, Miyajima M, Matsumoto K, Saika S.
    • Organizer
      Annual Meeting of ARVO (the Association for Research in Vision and Ophthalmology
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Loss of tenascin X impaired corneal epithelial wound healing in mice.2019

    • Author(s)
      Sumioka T, Okada Y, Iwanishi H, Yamanaka O, Takada Y, Ichikawa K, Miyajima M, Matsumoto K, Saika S.
    • Organizer
      Gordon Research Conferences (Biology & Pathobiology of The Cornea)
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2021-01-27  

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