生体内系譜追跡による脂肪由来幹細胞の機能解析と新規再生治療法の開発

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K09490
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 須永 中 自治医科大学, 医学部, 講師 (00406117)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉村 浩太郎 自治医科大学, 医学部, 教授 (60210762) ; 宇田 宏一 自治医科大学, 医学部, 准教授 (20337306)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 系譜追跡

Outline of Annual Research Achievements

Prx1発現細胞特異的にCre recombinaseを発現するPrx1Creマウスと、Cre recombinaseを発現した細胞において赤色蛍光色素Ai14を発現するRosa26-LSL-tdTomatoマウス（Ai14マウス）、Ⅰ型コラーゲン発現細胞がEGFPを発現するCol1/EGFPマウスを交配することにより、Prx1発現細胞に由来する細胞がtdTomatoを恒久的に発現し、なおかつⅠ型コラーゲン発現細胞がEGFPを発現するPrx1Cre;Ai14;Col1/EGFPマウス（以下PAGマウス）を作製した。
PAGマウスの鼠径部より採取した脂肪組織をコラゲナーゼにて分解し、遠心分離にて沈殿した間質細胞を初代培養した。初代培養時ではtdTomato陽性細胞と陰性細部が混在しており、ほぼ全てtdTomato陽性のADSCsのみとなった。
また、ADSCs移植実験に用いる腱損傷モデルを確立した。具体的には、拡大鏡下にメスを用いてマウスのアキレス腱を部分断裂させ、2週・4週後に組織を観察した。2週の時点では損傷部のコラーゲン配列は不整であったが、4週後にはほぼ正常な構造を回復していた。
ここで遺伝子改変マウスを飼育している実験医学センターの移転に伴い、マウスのSPF化させる必要が生じ、一旦全ての実験を中断することになってしまった。現在、マウスの胚移植を経て全ての系統のマウスを一から繁殖・交配させているところである。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

遺伝子改変マウスを飼育している実験医学センターの移転に伴い、マウスのSPF化させる必要が生じ、一旦全ての実験を中断することになってしまったため、大幅に研究が遅れている。現在、マウスの胚移植を経て全ての系統のマウスを一から繁殖・交配させているところである。

Strategy for Future Research Activity

速やかに実験に必要なマウスの系を復活させ、組織損傷モデルへのADSCs移植実験を行う。

Causes of Carryover

実験医学センター移転に伴う実験の中断により計画が遅れたため、当該年度の余剰金が発生したが、当初の計画通りの実験を遂行していく予定である。