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2018 Fiscal Year Research-status Report

骨髄由来細胞が分泌する神経再生因子の解析ー脊髄損傷の治療に向けてー

Research Project

Project/Area Number 18K09499
Research InstitutionAino University

Principal Investigator

中野 法彦  藍野大学, 中央研究施設, 准教授 (40322721)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 井出 千束  藍野大学, 医療保健学部, 教授 (70010080)
Project Period (FY) 2018-04-01 – 2021-03-31
Keywords神経再生 / 骨髄間質細胞 / 脊髄損傷
Outline of Annual Research Achievements

我々は、これまでに骨髄間質細胞を脊髄損傷モデルラットに移植すると、形態学的および行動学的に著名に回復することを明らかにしてきた。移植した骨髄間質細胞は脊髄内で最初は生着するが、2~3週間後には消失することから、骨髄間質細胞は宿主に組み込まれて効果を発揮するのではなく、細胞から分泌された液性因子によって効果をもたらすと考えられる。また、細胞調製がより簡便である骨髄単核球細胞を用いた移植も有効であることがわかってきた。そこで、我々は、骨髄間質細胞および骨髄単核球細胞が分泌する因子の網羅的解析が必要と考え、両者が分泌する神経再生因子の比較および分離精製を進めている。
まず、4週齢Sprague-Dawley (SD) ラットの大腿骨および脛骨の骨髄液から採取したラット骨髄間質細胞を継代培養し、無血清培養上清を回収した。これらの培養上清を新生仔ラットの海馬由来神経細胞に添加したところ、神経細胞の生存維持と突起伸長の促進がみられた。そこで、培養上清から、神経突起伸長能を指標にして、ヘパリンアフィニティー、イオン交換、ゲルろ過、逆相などの液体クロマトグラフィーを組み合わせて、神経突起伸長活性の有する分画の分離精製を行った。一連のカラムワークにより得られた精製標品は、質量分析計を用いて同定を行っている。
これまでの解析を通して、培養上清には神経再生に関わる因子が複数存在し、これらが協調して神経再生に携わっていると考えられる。これらの因子の性質について解析を進めている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

平成30年6月の大阪北部地震で本学は多大な被害を受け、培養室や液体クロマトグラフィーが数ヶ月にわたり使用できなかった。復旧したところから実験を再開している。

Strategy for Future Research Activity

地震で被害を受けた機器類はほぼ復旧した。復旧に伴い機器が新しい型になったことならびにこれまで得られたデータの蓄積を利用することにより、今後は効率よく研究が進むものと考えている。

Causes of Carryover

平成30年6月に起きた大阪北部地震で多大な被害を受けて、研究が数ヶ月にわたって中断した。次年度は、昨年度未実施である研究計画とともに、もともとの研究計画も行えるようになお一層注力していきたい。

  • Research Products

    (8 results)

All 2019 2018

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (7 results)

  • [Journal Article] Structures of filum terminale and characteristics of ependymal cells of its central canal in rats2019

    • Author(s)
      Nakano Norihiko、Kanekiyo Kenji、Yamada Yoshihiro、Tamachi Masahiro、Suzuki Yoshihisa、Fukushima Masatoshi、Saito Fukuki、Abe Seiya、Tsukagoshi Chihiro、Miyamoto Chimi、Ide Chizuka
    • Journal Title

      Brain Research

      Volume: 1707 Pages: 208~215

    • DOI

      10.1016/j.brainres.2018.11.038

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 細胞低接着性コラーゲンを足場とした神経細胞の突起伸長2019

    • Author(s)
      中野法彦, 兼清健志, 國井沙織, 森本康一, 尾前薫, 井出千束
    • Organizer
      第16回日本再生医療学会総会
  • [Presentation] ラット終糸の構造と中心菅上衣細胞の解析2019

    • Author(s)
      兼清健志, 中野法彦, 塚越千尋, 宮本陳敏, 安部征哉, 井出千束
    • Organizer
      第124回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [Presentation] 細胞低接着性コラーゲンを足場とした神経細胞の挙動解析2018

    • Author(s)
      中野法彦, 兼清健志, 國井沙織, 森本康一, 尾前薫, 井出千束
    • Organizer
      第91回日本生化学会大会
  • [Presentation] 脊髄損傷ラットに対する骨髄間質細胞培養上清の投与効果2018

    • Author(s)
      兼清健志, 中野法彦, 安部征哉, 塚越千尋, 宮本陳敏, 井出千束
    • Organizer
      第91回日本生化学会大会
  • [Presentation] Effects of conditioned medium from bone marrow stromal cells on rat spinal cord injury.2018

    • Author(s)
      兼清健志, 中野法彦, 安部征哉, 塚越千尋, 宮本陳敏, 井出千束
    • Organizer
      第41回日本神経科学大会
  • [Presentation] 細胞低接着性コラーゲンを足場とした神経系細胞2018

    • Author(s)
      中野法彦, 兼清健志, 國井沙織, 森本康一, 尾前薫, 井出千束
    • Organizer
      第59回組織細胞化学会総会・学術集会
  • [Presentation] 細胞低接着性コラーゲンによる神経細胞の活性化と組織再生機能の検証2018

    • Author(s)
      國井沙織, 兼清健志, 中野法彦, 加藤暢宏, 尾前薫, 井出千束, 森本康一
    • Organizer
      第40回日本バイオマテリアル学会大会

URL: 

Published: 2019-12-27  

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